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甜筒D新蟲 (初入文壇)
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[求助]
sod，pod測定是遇到的問題 已有2人參與
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在測定sod的過程中，由于第一批用試劑盒測定的數(shù)據(jù)不好，只能重新測了，其中2個梯度的材料總共只剩下0.2g葉片材料保存于-80，其他3批材料還有還有0.6g，所以只能按比例減少用量來測定，一共還要測定sod，pod，cat，可溶性糖，Pro，葉綠素含量，mda，任務(wù)多，材料少，現(xiàn)在正在探索用0.05g材料去實驗，有沒有大神懂用的材料少可不可以測定出結(jié)果來。 現(xiàn)在的主要問題是我的磷酸緩沖液是0.05mol，ph=7.8的，研磨完液體就會變成紅棕色，這樣的酶液還能不能用是不是已經(jīng)失活了還能不能測定？而且很快就會變色，會不會是因為室溫太高了造成的？現(xiàn)在由于材料有限，只能講上清液稀釋才夠用，稀釋之后影響測定結(jié)果嗎，還是直接用0.05g材料加入5ml緩沖液測定呢？還有就是在4000lx的光下反應(yīng)8分鐘時A0=0 8,按照實驗說明就應(yīng)該停止反應(yīng)了，可是其他測定管還沒有變色，看不出有沒有大道50%的抑制率，不明白50%抑制率是一個什么標(biāo)準(zhǔn)。求大神指點，問題有點多 發(fā)自小木蟲Android客戶端 |
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甜筒D
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4樓2017-09-28 21:25:23
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甜筒D(晉鵬代發(fā)): 金幣+2, 鼓勵回帖交流~歡迎常來農(nóng)林版交流經(jīng)驗~ 2017-09-28 21:26:03
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研磨完的顏色要看你具體的材料是啥。另外根據(jù)樓主的描述，建議提取液中添加適量PVP防止組織中的酚氧化產(chǎn)生別的顏色干擾結(jié)果。另外，材料一般可以成比例減少用量，但最好保證材料質(zhì)量和提取液的比例不變，后面公式計算活性時再乘減少的倍數(shù)即可。祝好！ 發(fā)自小木蟲Android客戶端 |
2樓2017-09-28 20:31:29
甜筒D
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3樓2017-09-28 21:15:35
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【答案】應(yīng)助回帖
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考慮到你樣品少并且測的指標(biāo)多，可以考慮少取材料，比如說文獻是0.5g，實際可以用0.1g。提取液體積不變的話，不就相當(dāng)于稀釋5倍嘛 發(fā)自小木蟲Android客戶端 |
5樓2017-09-28 21:58:53
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