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yaoxuexuezi

至尊木蟲(chóng) (職業(yè)作家)

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[求助] 求助RAW264.7細(xì)胞NF-KB通路的問(wèn)題

我在用RAW264.7細(xì)胞做抗炎研究，想做NF-KB通路，摸索了好長(zhǎng)時(shí)間，有些蛋白已經(jīng)做出來(lái)了，但是P-ikk,P-P65等幾個(gè)指標(biāo)蛋白條帶始終不是很清楚，想問(wèn)一下做過(guò)這方面實(shí)驗(yàn)的，LPS刺激細(xì)胞時(shí)使用的濃度是多少？刺激時(shí)間多久？western時(shí)上樣量多少？

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1樓 2013-09-13 14:51:54

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愛(ài)知識(shí)-圓圓

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【答案】應(yīng)助回帖

★
yaoxuexuezi: 金幣+1, 一樣的上樣量但是有的跑出來(lái)了有的沒(méi)有 2013-09-14 15:00:35

你前面的蛋白不是做出來(lái)了嗎，一樣的條件做不出來(lái)嗎？

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3樓2013-09-14 10:41:03

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風(fēng)中的羽翼_

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【答案】應(yīng)助回帖

★
yaoxuexuezi: 金幣+1, 博學(xué)EPI+1 2013-09-13 21:52:29

我實(shí)驗(yàn)沒(méi)做出來(lái)，我從文獻(xiàn)了解到應(yīng)該用0.1-10μg/ml的濃度

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2樓2013-09-13 20:25:18

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愛(ài)知識(shí)-圓圓

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【答案】應(yīng)助回帖

★ ★
yaoxuexuezi: 金幣+2, 不同的蛋白貌似表達(dá)量不一樣吧，western時(shí)已經(jīng)上樣量很大了但是有些蛋白還是沒(méi)跑出來(lái)，看你專(zhuān)業(yè)應(yīng)該是專(zhuān)家，能給個(gè)QQ向您請(qǐng)教下嗎？ 2013-09-14 15:00:06

引用回帖:

3樓: Originally posted by 愛(ài)知識(shí)-圓圓 at 2013-09-14 10:41:03
你前面的蛋白不是做出來(lái)了嗎，一樣的條件做不出來(lái)嗎？

我用的是10μg/ml,文獻(xiàn)里面有很多有的是1μg/ml

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4樓2013-09-14 10:41:58

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引用回帖:

4樓: Originally posted by 愛(ài)知識(shí)-圓圓 at 2013-09-14 10:41:58
我用的是10μg/ml,文獻(xiàn)里面有很多有的是1μg/ml...

不同的蛋白貌似表達(dá)量不一樣吧，western時(shí)已經(jīng)上樣量很大了但是有些蛋白還是沒(méi)跑出來(lái)，看你專(zhuān)業(yè)應(yīng)該是專(zhuān)家，能給個(gè)QQ向您請(qǐng)教下嗎？

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5樓2013-09-14 15:01:09

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