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[交流]
【求助/交流】流式 細胞數(shù)量問題 已有2人參與
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今天第一次做流式，是拿到其它分院實驗室做的 三管情況是這樣的： 第一管，實驗組細胞（長期藥物處理的細胞），未加抗體（這是某個老師讓做的，防止細胞自發(fā)熒光） 第二管，對照組（未處理的細胞），加熒光標記的抗體 第三管，實驗組（長期藥物處理的細胞），加熒光標記的抗體 目的是檢測第二管和第三管細胞兩者表面蛋白的表達差異。 問題是這樣：第三管細胞數(shù)量偏少，10分鐘時間還沒有統(tǒng)計到1000個細胞，人家就不讓做了。說是必須到1萬個細胞，我提出統(tǒng)計一下熒光值，拿第三組1000細胞和二組10000個細胞比較一下，如果三大于二，一樣可以反應問題，可人家說沒有統(tǒng)計學意義，讓重新做。 其實我離心時就發(fā)現(xiàn)第三管細胞數(shù)量少于第二管，計數(shù)有誤差，但主要問題還是離心把細胞丟失的，因為第一管沒有離心，細胞數(shù)量是沒有問題的。 明天再做我該注意什么呢？細胞數(shù)量再增加是對的吧，熒光抗體量也多加一點。 |
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