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xingkong544銅蟲 (小有名氣)
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[求助]
高效液相色譜測(cè)單糖(紫外檢測(cè)器) 已有2人參與
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各位蟲友們,本人已被這個(gè)問題困擾很久,求助萬能的蟲友們…我想咨詢下,Pmp衍生化測(cè)單糖,對(duì)單糖的濃度有什么要求嗎?濃度梯度是怎么確定的?我用的單糖的濃度梯度是0.2g/L~1g/L共5個(gè)濃度梯度…發(fā)現(xiàn)峰面積并不是成比例的…心累啊…再者,PMp的濃度按文獻(xiàn)稀釋了10倍,峰高還是3000mA左右…會(huì)不會(huì)太高…和衍生物的峰高放在一起,譜圖畫面有點(diǎn)不和諧。(duì)于PMp過量的問題,要達(dá)到多少就可以呢?有什么要求嗎?這個(gè)衍生化反應(yīng)的徹底嗎?查了幾篇文獻(xiàn),并沒有看到這方面的說法…還請(qǐng)蟲友們指教… 發(fā)自小木蟲Android客戶端 |
銅蟲 (小有名氣)
送紅花一朵 |
您好,我把原溶液按比例稀釋后又做了一遍,發(fā)現(xiàn)所有的單糖幾乎會(huì)在同一個(gè)位置出峰,(因?yàn)殡s峰比較多,只能先單個(gè)單糖跑,確定他的出峰位置,再跑混標(biāo)。我單跑6種單糖的時(shí)候,發(fā)現(xiàn)每種單糖的出峰時(shí)間非常相似,根本分不開,還有就是,一個(gè)特別奇怪的現(xiàn)象,我的單糖事是按比例稀釋的,但是跑出的峰面積線性關(guān)系還是非常差。)而且流動(dòng)相磷酸鹽緩沖液和乙腈的比例也調(diào)了,調(diào)的乙腈體積分?jǐn)?shù)最低為13%,PMp大概10min左右出峰吧,但是它拖尾特別嚴(yán)重,拖了大概10min的樣子,總共跑了40min左右的樣子,一直都沒有峰出現(xiàn)。我已經(jīng)很小心地在配溶液了。心累…快要崩潰了~我現(xiàn)在陷入了迷茫之中…還請(qǐng)您再指點(diǎn)迷津…萬分感謝。。謝謝您! 發(fā)自小木蟲Android客戶端 |
木蟲 (著名寫手)
銅蟲 (小有名氣)
送紅花一朵 |
好的,謝謝您的意見。我按照您的意見再做一次,那我是不是可以把PMp濃度降一點(diǎn)?如果按文獻(xiàn)中的0.5M感覺是理論量的千倍了快…會(huì)不會(huì)超出檢測(cè)上限… 發(fā)自小木蟲Android客戶端 |
木蟲 (著名寫手)
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