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xingkong544銅蟲 (小有名氣)
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[求助]
高效液相色譜測單糖（紫外檢測器） 已有2人參與
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各位蟲友們，本人已被這個問題困擾很久，求助萬能的蟲友們…我想咨詢下，Pmp衍生化測單糖，對單糖的濃度有什么要求嗎？濃度梯度是怎么確定的��？我用的單糖的濃度梯度是0.2g/L~1g/L共5個濃度梯度…發(fā)現(xiàn)峰面積并不是成比例的…心累啊…再者，PMp的濃度按文獻(xiàn)稀釋了10倍，峰高還是3000mA左右…會不會太高…和衍生物的峰高放在一起，譜圖畫面有點(diǎn)不和諧啊！對于PMp過量的問題，要達(dá)到多少就可以呢？有什么要求嗎？這個衍生化反應(yīng)的徹底嗎？查了幾篇文獻(xiàn)，并沒有看到這方面的說法…還請蟲友們指教… 發(fā)自小木蟲Android客戶端 |
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xingkong544
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好的，謝謝您的意見。我按照您的意見再做一次，那我是不是可以把PMp濃度降一點(diǎn)？如果按文獻(xiàn)中的0.5M感覺是理論量的千倍了快…會不會超出檢測上限… 發(fā)自小木蟲Android客戶端 |
3樓2017-05-11 10:54:53
shi102241218
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2樓2017-05-11 10:33:30
shi102241218
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4樓2017-05-11 17:09:22
xingkong544
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您好，我把原溶液按比例稀釋后又做了一遍，發(fā)現(xiàn)所有的單糖幾乎會在同一個位置出峰，（因?yàn)殡s峰比較多，只能先單個單糖跑，確定他的出峰位置，再跑混標(biāo)。我單跑6種單糖的時候，發(fā)現(xiàn)每種單糖的出峰時間非常相似，根本分不開，還有就是，一個特別奇怪的現(xiàn)象，我的單糖事是按比例稀釋的，但是跑出的峰面積線性關(guān)系還是非常差。）而且流動相磷酸鹽緩沖液和乙腈的比例也調(diào)了，調(diào)的乙腈體積分?jǐn)?shù)最低為13%，PMp大概10min左右出峰吧，但是它拖尾特別嚴(yán)重，拖了大概10min的樣子，總共跑了40min左右的樣子，一直都沒有峰出現(xiàn)。我已經(jīng)很小心地在配溶液了。心累…快要崩潰了~我現(xiàn)在陷入了迷茫之中…還請您再指點(diǎn)迷津…萬分感謝。。謝謝您！ 發(fā)自小木蟲Android客戶端 |
5樓2017-05-17 09:44:31
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