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[交流]
【求助】求助ACE抑制活性的測定方法 已有7人參與
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| 各位有沒有做過ACE抑制活性的體外測定的,即ACE與HHL反應生成馬尿酸的分光光度法測定。本人實驗幾次結果均不理想,現(xiàn)求助具體測定方法內容,越詳細越好。非常感謝,祝愿大家心想事成,萬事如意! |
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我?guī)熜肿鲞^ACE抑制活性的測定: 用含有0.3mol/L NaCl的0.1mol/L硼酸鹽緩沖液(pH8.3)將Hip-His-Leu配成5.0mmol/L的溶液。在10ml試管中加入200μl的5.0mmol/L Hip-His-Leu溶液和80μl的樣品,于37℃保溫3min后,再加入20μl ACE溶液(溶解于蒸餾水中,活力為0.1U/ml),混勻后在37℃保溫30min,再加入250μl的1.0mol/L的鹽酸溶液以終止反應,再加入1.7ml醋酸乙酯,經15s振蕩混勻后靜置5min,用移液管吸取1.0ml的醋酸乙酯層,120℃烘箱烘干,加入1.0ml蒸餾水,混勻后在波長228nm處測定吸光度。在上述條件下,抑制50%的ACE活性(IC50)為樣品的一個活性單位。 ACE抑制率(%)=(B-A)/A×100% 式中:A為含有樣品和ACE溶液的吸光度;B為不含樣品,但含有ACE溶液的吸光度。 |

木蟲 (正式寫手)
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