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[交流]
【求助】求助ACE抑制活性的測(cè)定方法 已有7人參與
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| 各位有沒(méi)有做過(guò)ACE抑制活性的體外測(cè)定的，即ACE與HHL反應(yīng)生成馬尿酸的分光光度法測(cè)定。本人實(shí)驗(yàn)幾次結(jié)果均不理想，現(xiàn)求助具體測(cè)定方法內(nèi)容，越詳細(xì)越好。非常感謝，祝愿大家心想事成，萬(wàn)事如意！ |
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★ ★
shuoshine(金幣+1):謝謝參與
shuoshine(金幣+5): 2010-06-08 09:04:13
hawkyin(金幣+1):謝謝回貼 2010-06-09 15:27:41
shuoshine(金幣+1):謝謝參與
shuoshine(金幣+5): 2010-06-08 09:04:13
hawkyin(金幣+1):謝謝回貼 2010-06-09 15:27:41
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我?guī)熜肿鲞^(guò)ACE抑制活性的測(cè)定： 用含有0.3mol/L NaCl的0.1mol/L硼酸鹽緩沖液(pH8.3)將Hip-His-Leu配成5.0mmol/L的溶液。在10ml試管中加入200μl的5.0mmol/L Hip-His-Leu溶液和80μl的樣品，于37℃保溫3min后，再加入20μl ACE溶液(溶解于蒸餾水中，活力為0.1U/ml)，混勻后在37℃保溫30min，再加入250μl的1.0mol/L的鹽酸溶液以終止反應(yīng)，再加入1.7ml醋酸乙酯，經(jīng)15s振蕩混勻后靜置5min，用移液管吸取1.0ml的醋酸乙酯層，120℃烘箱烘干，加入1.0ml蒸餾水，混勻后在波長(zhǎng)228nm處測(cè)定吸光度。在上述條件下，抑制50%的ACE活性(IC50)為樣品的一個(gè)活性單位。 ACE抑制率（%）=（B-A）/A×100% 式中：A為含有樣品和ACE溶液的吸光度；B為不含樣品，但含有ACE溶液的吸光度。 |
7樓2010-06-07 17:47:32
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嗯，這個(gè)具體的我也不知道，O(∩_∩)O~因?yàn)閹熜之厴I(yè)了。等我問(wèn)了再告訴你吧。 我查了幾篇文獻(xiàn)，你可以參考一下。前兩篇中的ACE抑制率的公式是和你說(shuō)的一樣的。 ACE-inhibitory peptides identified from the muscle protein hydrolysate of hard clam(Meretrix lusoria) Process Biochemistry 43 (2008) 743–747 Angiotensin I-converting enzyme (ACE) inhibitory activities of sardinelle (Sardinella aurita)by-products protein hydrolysates obtained by treatment with microbial and visceral fish serine proteases Food Chemistry 111 (2008) 350–356 Antihypertensive effect of an angiotensin I-converting enzyme inhibitory peptide from bullfrog(Rana catesbeiana Shaw) muscle protein in spontaneously hypertensive rats Process Biochemistry 42 (2007) 1443–1448 |
9樓2010-06-08 16:16:56
2樓2010-06-07 11:18:25
remainlove
木蟲(chóng) (正式寫(xiě)手)
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3樓2010-06-07 14:27:25
4樓2010-06-07 15:25:34
5樓2010-06-07 15:29:19
6樓2010-06-07 15:55:57
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非常感謝玉蘭花同學(xué)，還有個(gè)問(wèn)題我想知道，請(qǐng)問(wèn)你師兄做的這個(gè)實(shí)驗(yàn)重現(xiàn)性怎么樣？具體參照的是誰(shuí)的方法？能否給予文獻(xiàn)來(lái)源？ 怎么最后的計(jì)算結(jié)果里沒(méi)有提前加了鹽酸的吸光度值呢？ 我看過(guò)的公式里面是ACE抑制率（%）=（b-a）/（b-c）×100%其中：b為反應(yīng)中不加抑制劑的光密度值，a為反應(yīng)中ACE和ACE抑制劑同時(shí)存在的光密度值，c為ACE與HHL空白反應(yīng)的光密度值。請(qǐng)求你的解答，多謝了！ |
8樓2010-06-08 09:10:36
10樓2010-06-08 16:40:03
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