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[交流]
【求助】求助ACE抑制活性的測定方法 已有7人參與
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| 各位有沒有做過ACE抑制活性的體外測定的,即ACE與HHL反應(yīng)生成馬尿酸的分光光度法測定。本人實(shí)驗(yàn)幾次結(jié)果均不理想,現(xiàn)求助具體測定方法內(nèi)容,越詳細(xì)越好。非常感謝,祝愿大家心想事成,萬事如意! |
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我?guī)熜肿鲞^ACE抑制活性的測定: 用含有0.3mol/L NaCl的0.1mol/L硼酸鹽緩沖液(pH8.3)將Hip-His-Leu配成5.0mmol/L的溶液。在10ml試管中加入200μl的5.0mmol/L Hip-His-Leu溶液和80μl的樣品,于37℃保溫3min后,再加入20μl ACE溶液(溶解于蒸餾水中,活力為0.1U/ml),混勻后在37℃保溫30min,再加入250μl的1.0mol/L的鹽酸溶液以終止反應(yīng),再加入1.7ml醋酸乙酯,經(jīng)15s振蕩混勻后靜置5min,用移液管吸取1.0ml的醋酸乙酯層,120℃烘箱烘干,加入1.0ml蒸餾水,混勻后在波長228nm處測定吸光度。在上述條件下,抑制50%的ACE活性(IC50)為樣品的一個(gè)活性單位。 ACE抑制率(%)=(B-A)/A×100% 式中:A為含有樣品和ACE溶液的吸光度;B為不含樣品,但含有ACE溶液的吸光度。 |

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嗯,這個(gè)具體的我也不知道,O(∩_∩)O~因?yàn)閹熜之厴I(yè)了。等我問了再告訴你吧。 我查了幾篇文獻(xiàn),你可以參考一下。前兩篇中的ACE抑制率的公式是和你說的一樣的。 ACE-inhibitory peptides identified from the muscle protein hydrolysate of hard clam(Meretrix lusoria) Process Biochemistry 43 (2008) 743–747 Angiotensin I-converting enzyme (ACE) inhibitory activities of sardinelle (Sardinella aurita)by-products protein hydrolysates obtained by treatment with microbial and visceral fish serine proteases Food Chemistry 111 (2008) 350–356 Antihypertensive effect of an angiotensin I-converting enzyme inhibitory peptide from bullfrog(Rana catesbeiana Shaw) muscle protein in spontaneously hypertensive rats Process Biochemistry 42 (2007) 1443–1448 |

木蟲 (正式寫手)

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