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冷霜曉月新蟲 (初入文壇)
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[求助]
構(gòu)建植物過表達(dá)載體需不需要加入目的片段前的5'UTR?
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| 不加入是否會導(dǎo)致將來翻譯時核糖體沒有結(jié)合位點,無法翻譯出蛋白?如果可以不加入5'UTR只用CDS,沒有5'UTR,核糖體又是怎么識別該mRNA片段再進(jìn)行翻譯的?實驗室有的人說可以不用,但又沒解釋個所以然出來,希望有大神能解釋一下~~~~ |
新蟲 (正式寫手)
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大家都覺得生物簡單,剛剛開始學(xué)的時候也是有死記硬背的感覺,后來才發(fā)現(xiàn)學(xué)生物需要理解原理和兼顧細(xì)節(jié),需要綜合運用所學(xué)的各個學(xué)科的知識邏輯推理,甚至是曾經(jīng)厭惡至極沒有好好學(xué)的數(shù)學(xué),不過好在可以規(guī)避思想政治那一套,也算幸運了。 建議多看看外文原版書(少看譯本,很多譯本趕時間,不但沒有糾正原版錯誤,還會引入很多。同時,很多術(shù)語和表達(dá)可能并不準(zhǔn)確。其實很多東西也是大佬做主編掛個名,一幫懵懂小碩悶頭查遍金山、有道、谷歌翻譯出來的,最后找個高年級博士查校一番…),外文書的講解方式很適合引發(fā)興趣。多看看關(guān)于某個理論或知識點的原始文獻(xiàn),不能總是像國內(nèi)教學(xué)所追求的記住結(jié)論。 發(fā)自小木蟲Android客戶端 |

新蟲 (正式寫手)

新蟲 (正式寫手)
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另外,植物表達(dá)的話,如果不是要去研究5'-UTR,或者有文獻(xiàn)說沒有它不行,一般只研究編碼基因功能的超表達(dá)建議只用完整的ORF區(qū)域。 發(fā)自小木蟲Android客戶端 |

新蟲 (初入文壇)
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能明確解釋下么?翻了書也沒找著解釋這塊的 ![]() 就想知道為什么可以只研究編碼基因功能的超表達(dá)建議只用完整的ORF區(qū)域?5'UTR部分不是有核糖體的結(jié)合部位么? 而且實驗室其他人說保險起見,基本上構(gòu)載體的時候都會在起始密碼子之前加十幾二十bp左右的5'UTR部分,并不是只用完整的ORF區(qū)域。不過有的時候不加也能表達(dá)出蛋白,但我就好奇不加的話,新轉(zhuǎn)進(jìn)去基因轉(zhuǎn)錄出來的mRNA序列不是就直接從AUG開始了么,核糖體是怎么識別新mRNA翻譯出蛋白的,不是只要有5'UTR特定的核苷酸序列才能被核糖體識別的么? |
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