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LYF_feng新蟲 (初入文壇)
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[求助]
老師，您好！我是初入生物實(shí)驗(yàn)室，剛開始做細(xì)胞實(shí)驗(yàn)。我養(yǎng)的HF... 已有1人參與
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老師，您好！我是初入生物實(shí)驗(yàn)室，剛開始做細(xì)胞實(shí)驗(yàn)。我養(yǎng)的HFF細(xì)胞和人臍帶血細(xì)胞長(zhǎng)不起來(lái)，狀態(tài)也不是很好。HFF細(xì)胞用的培養(yǎng)基是1640，人臍帶血細(xì)胞的是DMEM，都含有10%血清。請(qǐng)問(wèn)老師，細(xì)胞長(zhǎng)得慢，可能是什么原因，有什么建議 @gyesang 發(fā)自小木蟲IOS客戶端 |
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xiaoegg
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我科室養(yǎng)HFF細(xì)胞用10%FBS+DMEM+1%單抗，0.25%胰酶消化30s，800轉(zhuǎn)離心5min.只要原代細(xì)胞沒問(wèn)題，其它就沒什么。要是想長(zhǎng)得快，加大細(xì)胞量就好。我基本是一瓶T25傳10瓶T25。 發(fā)自小木蟲Android客戶端 |
9樓2017-01-22 11:09:54
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你好，我也是去年才入門，到現(xiàn)在吸收了一些經(jīng)驗(yàn)教訓(xùn)，希望能幫到你。我覺得長(zhǎng)得慢可能跟你seeding的細(xì)胞密度有關(guān)，還有你用的是什么血清，培養(yǎng)過(guò)程中是否有contamination，或者還可能你手里的細(xì)胞本身就不太好。建議可以先看看細(xì)胞培養(yǎng)的書。個(gè)人拙見，希望不要嫌棄。 發(fā)自小木蟲IOS客戶端 |
2樓2017-01-18 01:06:39
紫凝玲雨
新蟲 (初入文壇)
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【答案】應(yīng)助回帖
感謝參與，應(yīng)助指數(shù) +1
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你可以加大那個(gè)培養(yǎng)基的密度，10ml的培養(yǎng)基中加入1.5ml的細(xì)胞懸混液，或者你消化細(xì)胞的時(shí)候，不用胰酶，看看行不行 發(fā)自小木蟲Android客戶端 |
3樓2017-01-18 14:21:10
LYF_feng
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傳代是按1:4傳的，第一次傳代長(zhǎng)得還可以，第二次傳代就長(zhǎng)得慢了。血清是南美的。培養(yǎng)過(guò)程沒有污染。感謝幫助與建議 發(fā)自小木蟲IOS客戶端 |
4樓2017-01-18 15:02:04
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