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[求助]
老師，您好！我是初入生物實驗室，剛開始做細胞實驗。我養(yǎng)的HF... 已有1人參與
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老師，您好！我是初入生物實驗室，剛開始做細胞實驗。我養(yǎng)的HFF細胞和人臍帶血細胞長不起來，狀態(tài)也不是很好。HFF細胞用的培養(yǎng)基是1640，人臍帶血細胞的是DMEM，都含有10%血清。請問老師，細胞長得慢，可能是什么原因，有什么建議 @gyesang 發(fā)自小木蟲IOS客戶端 |
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你好，我也是去年才入門，到現(xiàn)在吸收了一些經驗教訓，希望能幫到你。我覺得長得慢可能跟你seeding的細胞密度有關，還有你用的是什么血清，培養(yǎng)過程中是否有contamination，或者還可能你手里的細胞本身就不太好。建議可以先看看細胞培養(yǎng)的書。個人拙見，希望不要嫌棄。 發(fā)自小木蟲IOS客戶端 |
2樓2017-01-18 01:06:39
5樓2017-01-18 15:03:40
cho-123
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細胞狀態(tài)不好的原因有很多：第一，傳代動作過于粗暴(消化過度，吹打過度)：第二，細胞傳代后不要總是拿出來看，密度也應該大一些：第三，建議傳代第二天換液。ps，不知道你具體怎么傳代 發(fā)自小木蟲IOS客戶端 |
8樓2017-01-21 18:01:32
紫凝玲雨
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你可以加大那個培養(yǎng)基的密度，10ml的培養(yǎng)基中加入1.5ml的細胞懸混液，或者你消化細胞的時候，不用胰酶，看看行不行 發(fā)自小木蟲Android客戶端 |
3樓2017-01-18 14:21:10
4樓2017-01-18 15:02:04
紫凝玲雨
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那你可以縮短消化時間，普通細胞不是消化3分鐘嗎，那你消化1分鐘，或者1.5分鐘這樣試試，因為細胞不好養(yǎng)的話，消化時間太長了對細胞不好 發(fā)自小木蟲Android客戶端 |
6樓2017-01-18 18:10:09
7樓2017-01-18 18:41:09
xiaoegg
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我科室養(yǎng)HFF細胞用10%FBS+DMEM+1%單抗，0.25%胰酶消化30s，800轉離心5min.只要原代細胞沒問題，其它就沒什么。要是想長得快，加大細胞量就好。我基本是一瓶T25傳10瓶T25。 發(fā)自小木蟲Android客戶端 |
9樓2017-01-22 11:09:54
10樓2017-02-28 22:13:46
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