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LYF_feng新蟲 (初入文壇)
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[求助]
老師，您好！我是初入生物實(shí)驗(yàn)室，剛開始做細(xì)胞實(shí)驗(yàn)。我養(yǎng)的HF... 已有1人參與
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老師，您好！我是初入生物實(shí)驗(yàn)室，剛開始做細(xì)胞實(shí)驗(yàn)。我養(yǎng)的HFF細(xì)胞和人臍帶血細(xì)胞長(zhǎng)不起來，狀態(tài)也不是很好。HFF細(xì)胞用的培養(yǎng)基是1640，人臍帶血細(xì)胞的是DMEM，都含有10%血清。請(qǐng)問老師，細(xì)胞長(zhǎng)得慢，可能是什么原因，有什么建議 @gyesang 發(fā)自小木蟲IOS客戶端 |
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你好，我也是去年才入門，到現(xiàn)在吸收了一些經(jīng)驗(yàn)教訓(xùn)，希望能幫到你。我覺得長(zhǎng)得慢可能跟你seeding的細(xì)胞密度有關(guān)，還有你用的是什么血清，培養(yǎng)過程中是否有contamination，或者還可能你手里的細(xì)胞本身就不太好。建議可以先看看細(xì)胞培養(yǎng)的書。個(gè)人拙見，希望不要嫌棄。 發(fā)自小木蟲IOS客戶端 |
2樓2017-01-18 01:06:39
LYF_feng
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5樓2017-01-18 15:03:40
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細(xì)胞狀態(tài)不好的原因有很多：第一，傳代動(dòng)作過于粗暴(消化過度，吹打過度)：第二，細(xì)胞傳代后不要總是拿出來看，密度也應(yīng)該大一些：第三，建議傳代第二天換液。ps，不知道你具體怎么傳代 發(fā)自小木蟲IOS客戶端 |
8樓2017-01-21 18:01:32
紫凝玲雨
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【答案】應(yīng)助回帖
感謝參與，應(yīng)助指數(shù) +1
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你可以加大那個(gè)培養(yǎng)基的密度，10ml的培養(yǎng)基中加入1.5ml的細(xì)胞懸混液，或者你消化細(xì)胞的時(shí)候，不用胰酶，看看行不行 發(fā)自小木蟲Android客戶端 |
3樓2017-01-18 14:21:10
LYF_feng
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傳代是按1:4傳的，第一次傳代長(zhǎng)得還可以，第二次傳代就長(zhǎng)得慢了。血清是南美的。培養(yǎng)過程沒有污染。感謝幫助與建議 發(fā)自小木蟲IOS客戶端 |
4樓2017-01-18 15:02:04
紫凝玲雨
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【答案】應(yīng)助回帖
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那你可以縮短消化時(shí)間，普通細(xì)胞不是消化3分鐘嗎，那你消化1分鐘，或者1.5分鐘這樣試試，因?yàn)榧?xì)胞不好養(yǎng)的話，消化時(shí)間太長(zhǎng)了對(duì)細(xì)胞不好 發(fā)自小木蟲Android客戶端 |
6樓2017-01-18 18:10:09
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7樓2017-01-18 18:41:09
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9樓2017-01-22 11:09:54
10樓2017-02-28 22:13:46
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