有做過雙基因共載體的大神們嗎?想請(qǐng)教一下具體細(xì)節(jié)如何把兩個(gè)基因整合到一個(gè)載體上 返回小木蟲查看更多
(1)嵌合,兩個(gè)在同一個(gè)啟動(dòng)子和終止子中間,第一個(gè)基因以TAA結(jié)束,而第二個(gè)基因以ATG開始,所以嵌合處序列為 TAA(TG) (2)用pDuet質(zhì)粒,有兩個(gè)MCS,各插入一個(gè)基因
分別表達(dá)自己的,不會(huì)互相干擾 蛋白相互作用,那是表達(dá)折疊之后的事情了
提前分析兩個(gè)目的基因的酶切位點(diǎn),選擇mcs的靠前位置的位點(diǎn)連接,也可以在設(shè)計(jì)兩段目的基因的引物時(shí)加入酶切位點(diǎn)(該酶不切目的基因),通過兩次克隆連接。串聯(lián)表達(dá)。 ,
兩個(gè)3000多的蛋白,要選好載體,
串聯(lián)表達(dá)唄,加linker
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(1)嵌合,兩個(gè)在同一個(gè)啟動(dòng)子和終止子中間,第一個(gè)基因以TAA結(jié)束,而第二個(gè)基因以ATG開始,所以嵌合處序列為 TAA(TG)
(2)用pDuet質(zhì)粒,有兩個(gè)MCS,各插入一個(gè)基因
分別表達(dá)自己的,不會(huì)互相干擾
蛋白相互作用,那是表達(dá)折疊之后的事情了
提前分析兩個(gè)目的基因的酶切位點(diǎn),選擇mcs的靠前位置的位點(diǎn)連接,也可以在設(shè)計(jì)兩段目的基因的引物時(shí)加入酶切位點(diǎn)(該酶不切目的基因),通過兩次克隆連接。串聯(lián)表達(dá)。
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兩個(gè)3000多的蛋白,要選好載體,
串聯(lián)表達(dá)唄,加linker