請教一個小白問題。 我從NCBI上下載了一批基因序列,請問有什么方法可以迅速判斷這些序列的方向性嗎?以至于后面做OTU分析時,不會因為序列方向相反而出現(xiàn)錯誤的OTU分組結(jié)果。 返回小木蟲查看更多
是不是想確認(rèn)基因在基因組上的正負鏈信息?基因序列都是5'~3'的,且比對的時候考慮了互補配對情況,對OTU分析沒影響吧
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是不是想確認(rèn)基因在基因組上的正負鏈信息?基因序列都是5'~3'的,且比對的時候考慮了互補配對情況,對OTU分析沒影響吧
謝謝回復(fù)啊!
是的,我就是想確定正負鏈。
然后,OTU分析時,正負鏈不影響分析結(jié)果的嗎?我一直以為OTU分析時都應(yīng)該是統(tǒng)一的正鏈或統(tǒng)一的負鏈,正負鏈混在一起,結(jié)果就會出錯。
另外,就算不影響OTU分析結(jié)果,如果是正負鏈混在一起比對時,那我不是很難看出來序列之間哪些地方相同,那些地方有差異?
不知道我有沒有表述清楚我的意思?
1)確定基因序列在基因組上的正負鏈情況,可以查詢這個基因的基本信息,還可以將其與基因組進行比對獲得信息
2)在序列對比時,會考慮互補鏈的情況
3)比對結(jié)果中,會有不一致的區(qū)域/堿基的信息,以blast的結(jié)果為例,一致的堿基用豎線連接,gap用-表示,不一致的堿基也一目了然
非常感謝你的回復(fù)!
我現(xiàn)在的情況是,我下載了多條序列,需要通過軟件比對找到這些序列之間的相同區(qū)域以及差異區(qū)域。但是如果我比對時這些序列是正負鏈混在一起的,那么軟件只是客觀地顯示出這些序列的比對結(jié)果(我用的mega軟件比對),并不會自動在比對過程中調(diào)整序列成為正鏈/負鏈。而我也不清楚這些序列中哪些是正鏈/負鏈,所以就無法正確獲得相同/差異區(qū)域。
你建議的第一點,說將其與基因組進行比對獲得信息,這對于我下載的多條序列來說,好像操作起來不是太合適呢(或者我沒有理解你說的操作步驟?)。查詢這個基因的基本信息,是哪個信息點會顯示出正負鏈呢?我好像在序列頁面沒看到相關(guān)信息耶。
還望指教!多謝多謝多謝
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1)我沒有實操過MEGA,確實很多多序列比對軟件在比對過程中并不會自動調(diào)整序列的正負鏈
2)假如你共有N條基因序列,可以以第一條為Ref,剩下的N-1條與其進行Blast(或其他軟件)比對,根據(jù)比對結(jié)果,決定基因序列是否需要用互補鏈
3)經(jīng)過上一步操作后,再進行多序列比對就不存在上述問題了
我現(xiàn)在就是以第一條為Ref,剩下的N-1條和它進行比對,但是從比對結(jié)果中我看不出來正負鏈信息。有些序列之間可能本來差異就比較大,所以我分不清這種序列差異是正負鏈導(dǎo)致的、還是序列本身就差異較大。
1)請貼比對信息截圖
2)正負鏈不影響差異