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PCR 條帶不亮
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| PCR擴增幾條氮循環(huán)相關的基因，引物是由已知序列設計的，但是擴增結(jié)果不理想，大多數(shù)條帶都不是很亮，與所跑Marker 相差甚遠。試圖增加過擴增循環(huán)數(shù)，但是效果不理想，也增加過退火溫度，但有的基因就直接擴增不出來。求問各位大神這是怎么回事？能否給點參考意見。不甚感激。 |
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他說的是降落pcr？最佳的退火溫度需要摸索 我的方法是用梯度pcr儀不用溫度都p一遍，還有一個方法就是二次pcr，基本就很亮了 發(fā)自小木蟲Android客戶端 |
5樓2016-03-04 18:31:53
sandycool
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建議你用第一次的PCR產(chǎn)物為模板，再進行一次pcr，我今天就是這樣的，克隆一個植物里面的酶基因，你試試吧。pcr的條件可以不用改 發(fā)自小木蟲IOS客戶端 |
7樓2016-03-04 20:44:07
8樓2016-03-07 20:07:20
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