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PCR 條帶不亮
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| PCR擴(kuò)增幾條氮循環(huán)相關(guān)的基因,引物是由已知序列設(shè)計(jì)的,但是擴(kuò)增結(jié)果不理想,大多數(shù)條帶都不是很亮,與所跑Marker 相差甚遠(yuǎn)。試圖增加過(guò)擴(kuò)增循環(huán)數(shù),但是效果不理想,也增加過(guò)退火溫度,但有的基因就直接擴(kuò)增不出來(lái)。求問(wèn)各位大神這是怎么回事?能否給點(diǎn)參考意見(jiàn)。不甚感激。 |

新蟲(chóng) (初入文壇)
木蟲(chóng) (正式寫(xiě)手)


新蟲(chóng) (正式寫(xiě)手)
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他說(shuō)的是降落pcr?最佳的退火溫度需要摸索 我的方法是用梯度pcr儀不用溫度都p一遍,還有一個(gè)方法就是二次pcr,基本就很亮了 發(fā)自小木蟲(chóng)Android客戶端 |
鐵蟲(chóng) (正式寫(xiě)手)
至尊木蟲(chóng) (職業(yè)作家)
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建議你用第一次的PCR產(chǎn)物為模板,再進(jìn)行一次pcr,我今天就是這樣的,克隆一個(gè)植物里面的酶基因,你試試吧。pcr的條件可以不用改 發(fā)自小木蟲(chóng)IOS客戶端 |
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