 |
 |
 |
 |
 |
 |
||
 |
 |
 |
 |
 |
| 查看: 1370 | 回復: 17 | ||
呂木木新蟲 (小有名氣)
|
[求助]
PCR程序 已有2人參與
|
|
我要克隆1900bp的片段，用的GXL酶，反應體系是：模板1微升，5×GXL Buffer5微升，MIXdNTP 2微升，引物1微升，酶0.5微升，ddH2O至25微升。 對應程序：94℃30 s，72℃ 2 min，5 個循環(huán)；94℃ 30 s，（溫度梯度）70℃ 40 s， 72℃ 2 min，5 個循環(huán)；94℃ 30 s，（溫度梯度）68℃ 40 s，72℃ 2 min，30 個循環(huán)；72℃ 10 min，4℃保存，但是一直跑不出來，什么條帶都沒有，跑了一個學期了，請問怎么修改程序或體系，溫度梯度怎么設(shè)置？ |
回復此樓» 猜你喜歡
不合理蛙科研實驗中的趣事：實驗器材的 “烏龍”
已經(jīng)有0人回復
-
不合理蛙科研實驗中的趣事：和實驗材料的 “斗智斗勇”
已經(jīng)有0人回復
-
化學工程及工業(yè)化學論文潤色/翻譯怎么收費?
已經(jīng)有221人回復
-
蛋白質(zhì)檢測：精準分析，解鎖生物分子的密碼
已經(jīng)有0人回復
-
不合理蛙科研實驗之小鼠實驗：嚴謹設(shè)計，解析生命機制的重要載體
已經(jīng)有0人回復
-
不合理蛙科研實驗之重金屬檢測：精準篩查，守護健康與環(huán)境的防線
已經(jīng)有0人回復
-
不合理蛙科研實驗之“蛙測重金屬我背鍋三千”
已經(jīng)有0人回復
-
不合理蛙科研實驗之“鼠逃三次我發(fā)三篇SCI”
已經(jīng)有0人回復
-
納米粒度分析
已經(jīng)有3人回復
-
林科院林化所招收材料與化工專業(yè)碩士，坐標南京
已經(jīng)有0人回復
2樓2016-03-05 21:22:16
sandycool
鐵蟲 (正式寫手)
- 應助: 16 (小學生)
- 金幣: 4845.6
- 散金: 55
- 紅花: 1
- 帖子: 324
- 在線: 71.1小時
- 蟲號: 2481681
- 注冊: 2013-05-25
- 專業(yè): 生物大分子結(jié)構(gòu)與功能
3樓2016-03-05 21:58:48
sandycool
鐵蟲 (正式寫手)
- 應助: 16 (小學生)
- 金幣: 4845.6
- 散金: 55
- 紅花: 1
- 帖子: 324
- 在線: 71.1小時
- 蟲號: 2481681
- 注冊: 2013-05-25
- 專業(yè): 生物大分子結(jié)構(gòu)與功能
|
現(xiàn)在有takara的兩個反轉(zhuǎn)錄試劑盒，一個是primescript 1st cDNA 試劑盒，另外一個是去除gDNA的試劑盒，不知道用哪個更好 發(fā)自小木蟲Android客戶端 |
4樓2016-03-05 22:01:27
呂木木
新蟲 (小有名氣)
- 應助: 0 (幼兒園)
- 金幣: 95.5
- 散金: 28
- 帖子: 53
- 在線: 9.9小時
- 蟲號: 4115673
- 注冊: 2015-10-02
- 性別: MM
- 專業(yè): 生物物理、生物化學與分子
5樓2016-03-05 22:10:19
呂木木
新蟲 (小有名氣)
- 應助: 0 (幼兒園)
- 金幣: 95.5
- 散金: 28
- 帖子: 53
- 在線: 9.9小時
- 蟲號: 4115673
- 注冊: 2015-10-02
- 性別: MM
- 專業(yè): 生物物理、生物化學與分子
6樓2016-03-05 22:11:05
呂木木
新蟲 (小有名氣)
- 應助: 0 (幼兒園)
- 金幣: 95.5
- 散金: 28
- 帖子: 53
- 在線: 9.9小時
- 蟲號: 4115673
- 注冊: 2015-10-02
- 性別: MM
- 專業(yè): 生物物理、生物化學與分子
7樓2016-03-05 22:12:00
sandycool
鐵蟲 (正式寫手)
- 應助: 16 (小學生)
- 金幣: 4845.6
- 散金: 55
- 紅花: 1
- 帖子: 324
- 在線: 71.1小時
- 蟲號: 2481681
- 注冊: 2013-05-25
- 專業(yè): 生物大分子結(jié)構(gòu)與功能
8樓2016-03-05 22:17:16
【答案】應助回帖
感謝參與，應助指數(shù) +1
|
不要盲目相信前輩啦，基因不一樣的話，如果長度不一樣，延伸時間就不一樣，退火溫度也不同，問題還可能出現(xiàn)在引物上，我覺得你可以看看酶的說明書，按上面的來。 發(fā)自小木蟲IOS客戶端 |
9樓2016-03-05 22:29:59
呂木木
新蟲 (小有名氣)
- 應助: 0 (幼兒園)
- 金幣: 95.5
- 散金: 28
- 帖子: 53
- 在線: 9.9小時
- 蟲號: 4115673
- 注冊: 2015-10-02
- 性別: MM
- 專業(yè): 生物物理、生物化學與分子
10樓2016-03-05 22:42:59
相關(guān)版塊跳轉(zhuǎn)
我要訂閱樓主 呂木木 的主題更新
| 最具人氣熱帖推薦 [查看全部] | 作者 | 回/看 | 最后發(fā)表 | |
|---|---|---|---|---|
|
[論文投稿]
申請回稿延期一個月，編輯同意了。但系統(tǒng)上的時間沒變，給編輯又寫郵件了，沒回復
 10+3
|
wangf9518 2026-03-17 | 4/200 |
|
|---|---|---|---|---|
|
|
[考研] 296求調(diào)劑 +3 | www_q 2026-03-18 | 6/300 |
|
|
[考研] 梁成偉老師課題組歡迎你的加入 +9 | 一鴨鴨喲 2026-03-14 | 11/550 |
|
|
|
[考博] 東華理工大學化材專業(yè)26屆碩士博士申請 +8 | zlingli 2026-03-13 | 8/400 |
|
|
|
[考研] 一志愿985，本科211，0817化學工程與技術(shù)319求調(diào)劑 +10 | Liwangman 2026-03-15 | 10/500 |
|
|
|
[考研] 085601專碩，總分342求調(diào)劑，地區(qū)不限 +5 | share_joy 2026-03-16 | 5/250 |
|
|
|
[考研]
 0854，計算機類招收調(diào)劑
+3
|
胡辣湯放糖 2026-03-15 | 6/300 |
|
|
|
[考研] 299求調(diào)劑 +5 | △小透明* 2026-03-17 | 5/250 |
|
|
|
[考博] 環(huán)境領(lǐng)域全國重點實驗室招收博士1-2名 +3 | QGZDSYS 2026-03-13 | 5/250 |
|
|
|
[考研] 生物學071000 329分求調(diào)劑 +3 | 我愛生物生物愛?/a> 2026-03-17 | 3/150 |
|
|
|
[碩博家園] 湖北工業(yè)大學 生命科學與健康學院-課題組招收2026級食品/生物方向碩士 +3 | 1喜春8 2026-03-17 | 5/250 |
|
|
|
[考研] 290求調(diào)劑 +3 | p asserby. 2026-03-15 | 4/200 |
|
|
|
[考研] 一志愿蘇州大學材料工程（085601）專碩有科研經(jīng)歷三項國獎兩個實用型專利一項省級立項 +6 | 大火山小火山 2026-03-16 | 8/400 |
|
|
|
[考研] 321求調(diào)劑 +5 | 大米飯！ 2026-03-15 | 5/250 |
|
|
|
[考研] 0703 物理化學調(diào)劑 +3 | 我可以上岸的對?/a> 2026-03-13 | 5/250 |
|
|
|
[考研] 0703化學調(diào)劑 290分有科研經(jīng)歷，論文在投 +7 | 膩膩gk 2026-03-14 | 7/350 |
|
|
|
[考研] 22408總分284求調(diào)劑 +3 | InAspic 2026-03-13 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 289求調(diào)劑 +4 | 這么名字咋樣 2026-03-14 | 6/300 |
|
|
|
[考研] 一志愿哈工大材料324分求調(diào)劑 +5 | 閆旭東 2026-03-14 | 5/250 |
|
|
|
[考研] 297求調(diào)劑 +4 | 學海漂泊 2026-03-13 | 4/200 |
|