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2012csc至尊木蟲 (知名作家)
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[求助]
細(xì)胞培養(yǎng) 已有1人參與
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| 最近實驗室很多人用CLARK胎牛血清（2.5%）養(yǎng)HepG2、MCF-7等細(xì)胞，黑膠蟲嚴(yán)重爆發(fā)，MCF-7細(xì)胞還伴隨著染菌狀況。更換Gibco小牛血清（10%），蟲子就不會爆發(fā)。但是CLARK的血清養(yǎng)HeLa細(xì)胞就沒用問題，培養(yǎng)液與細(xì)胞狀態(tài)都很好，這到底是不是血清問題呢？ |
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【答案】應(yīng)助回帖
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★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
2012csc: 金幣+10, ★★★很有幫助 2016-03-21 13:09:36
2012csc: 金幣+10, ★★★很有幫助 2016-03-21 13:09:36
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對于“黑膠蟲”的處理方法： 首先，血清買回來滅活前凍融應(yīng)逐級凍融，即按照-20℃——4℃完全融化后，再置入水浴中，與室溫一起升高到56度，這樣的目的是避免溫度驟變，導(dǎo)致血清中的營養(yǎng)物質(zhì)喪失活性。 第二，血清滅活后分裝保存。按照每次用血清的量分裝，盡量減少血清凍融的次數(shù)。分裝時注意無菌。 第三，細(xì)胞培養(yǎng)時血清濃度稍大一些。通常細(xì)胞培養(yǎng)血清濃度為10%-15%，但如果血清凍融次數(shù)過多，那營養(yǎng)物質(zhì)喪失活性，按15%的濃度配制事實上達(dá)不到15%的營養(yǎng)成分，故培養(yǎng)基配置時一般用18%-20%的血清。 |
2樓2016-03-21 12:22:32
2012csc
至尊木蟲 (知名作家)
- 應(yīng)助: 3 (幼兒園)
- 金幣: 37019.9
- 散金: 1200
- 紅花: 15
- 帖子: 9642
- 在線: 246.1小時
- 蟲號: 1946227
- 注冊: 2012-08-19
- 專業(yè): 細(xì)胞信號轉(zhuǎn)導(dǎo)
3樓2016-03-21 13:15:07
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