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2012csc至尊木蟲 (知名作家)
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[求助]
細胞培養(yǎng) 已有1人參與
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| 最近實驗室很多人用CLARK胎牛血清(2.5%)養(yǎng)HepG2、MCF-7等細胞,黑膠蟲嚴重爆發(fā),MCF-7細胞還伴隨著染菌狀況。更換Gibco小牛血清(10%),蟲子就不會爆發(fā)。但是CLARK的血清養(yǎng)HeLa細胞就沒用問題,培養(yǎng)液與細胞狀態(tài)都很好,這到底是不是血清問題呢? |

至尊木蟲 (知名作家)

商家已經(jīng)主動聲明此回帖可能含有宣傳內(nèi)容|
對于“黑膠蟲”的處理方法: 首先,血清買回來滅活前凍融應(yīng)逐級凍融,即按照-20℃——4℃完全融化后,再置入水浴中,與室溫一起升高到56度,這樣的目的是避免溫度驟變,導(dǎo)致血清中的營養(yǎng)物質(zhì)喪失活性。 第二,血清滅活后分裝保存。按照每次用血清的量分裝,盡量減少血清凍融的次數(shù)。分裝時注意無菌。 第三,細胞培養(yǎng)時血清濃度稍大一些。通常細胞培養(yǎng)血清濃度為10%-15%,但如果血清凍融次數(shù)過多,那營養(yǎng)物質(zhì)喪失活性,按15%的濃度配制事實上達不到15%的營養(yǎng)成分,故培養(yǎng)基配置時一般用18%-20%的血清。 |
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