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zhouhai2015新蟲(chóng) (初入文壇)
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[求助]
老師您好,我最近用氣質(zhì)聯(lián)用測(cè)魚(yú)組織里的脂肪酸,買(mǎi)了37種混標(biāo)... 已有3人參與
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老師您好,我最近用氣質(zhì)聯(lián)用測(cè)魚(yú)組織里的脂肪酸,買(mǎi)了37種混標(biāo)(每種含量已知),我可不可以直接用混標(biāo)配成不同梯度濃度,對(duì)每種我要測(cè)的脂肪酸做個(gè)標(biāo)準(zhǔn)曲線,用這標(biāo)準(zhǔn)曲線來(lái)定量呢?如果我有內(nèi)標(biāo)的話,改怎么定量呢? @lovibond 發(fā)自小木蟲(chóng)Android客戶端 |
鐵桿木蟲(chóng) (著名寫(xiě)手)
海貓
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第一、可以的用混標(biāo)來(lái)做標(biāo)準(zhǔn)曲線的,一般采用外標(biāo)法,峰要分開(kāi)。有標(biāo)準(zhǔn)品就用外標(biāo)就好。 第二、內(nèi)標(biāo)法(Internal Standard Method)是色譜分析中一種比較準(zhǔn)確的定量方法,尤其在沒(méi)有標(biāo)準(zhǔn)物對(duì)照時(shí),此方法更顯其優(yōu)越性。內(nèi)標(biāo)法是將一定重量的純物質(zhì)作為內(nèi)標(biāo)物(參見(jiàn)內(nèi)標(biāo)物條)加到一定量的被分析樣品混合物中,然后對(duì)含有內(nèi)標(biāo)物的樣品進(jìn)行色譜分析,分別測(cè)定內(nèi)標(biāo)物和待測(cè)組分的峰面積(或峰高)及相對(duì)校正因子,按公式即可求出被測(cè)組分在樣品中的百分含量。 第三、采用內(nèi)標(biāo)法定量時(shí),內(nèi)標(biāo)物的選擇十分重要。內(nèi)標(biāo)物應(yīng)當(dāng)是一個(gè)能得到純樣的已知化合物,這樣它能以準(zhǔn)確、已知的量加到樣品中去,它應(yīng)當(dāng)和被分析的樣品組分有基本相同或盡可能一致的物理化學(xué)性質(zhì)(如化學(xué)結(jié)構(gòu)、極性、揮發(fā)度及在溶劑中的溶解度等)、色譜行為和響應(yīng)特征,最好是被分析物質(zhì)的一個(gè)同系物。 |

木蟲(chóng) (文壇精英)
新蟲(chóng) (初入文壇)
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謝謝老師的回答! 如果我用混標(biāo)做標(biāo)準(zhǔn)曲線的話,這個(gè)濃度梯度有沒(méi)有個(gè)好的建議呢? 我買(mǎi)的是25mg的混標(biāo)里面還有37種脂肪酸,不是單標(biāo)! 如果我用內(nèi)標(biāo)法的話,我存在兩個(gè)問(wèn)題:第一,準(zhǔn)確稱量問(wèn)題,內(nèi)標(biāo)物質(zhì)我可以準(zhǔn)確稱量,但待測(cè)樣品在甲酯化前可以準(zhǔn)確稱出來(lái),甲酯化之后用正己烷萃取出來(lái),怎么去稱它的質(zhì)量? 第二,這個(gè)相對(duì)校正因子需要自己測(cè)么? 發(fā)自小木蟲(chóng)Android客戶端 |
新蟲(chóng) (初入文壇)
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謝謝,我買(mǎi)了37種混標(biāo),也買(mǎi)了一個(gè)內(nèi)標(biāo)! 你說(shuō)的這個(gè)方法可以么? 發(fā)自小木蟲(chóng)Android客戶端 |
專家顧問(wèn) (職業(yè)作家)
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專家經(jīng)驗(yàn): +1860 |
木蟲(chóng) (小有名氣)
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可以用混標(biāo)來(lái)做標(biāo)準(zhǔn)曲線的,就叫做外標(biāo)法,用60m的柱子,應(yīng)該就能分開(kāi)。脂肪酸做的太多了,你搜一搜文獻(xiàn)應(yīng)該就有很多,什么微生物代謝中的,土壤等等,叔丁基甲基醚作溶劑,甲酯化就可以。 內(nèi)標(biāo)法的話就要選擇一種內(nèi)標(biāo)物,內(nèi)標(biāo)物最好和分析的樣品組分有基本相同或盡可能一致,做標(biāo)準(zhǔn)曲線時(shí),就是外標(biāo)的峰面積比上內(nèi)標(biāo)的峰面積,然后跟濃度做標(biāo)曲。內(nèi)標(biāo)更標(biāo)準(zhǔn),因?yàn)樗梢员M可能避免樣品基質(zhì)的影響,不過(guò)一般外標(biāo)法就可以。 |

新蟲(chóng) (初入文壇)
新蟲(chóng) (初入文壇)
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我現(xiàn)在要做內(nèi)標(biāo)標(biāo)準(zhǔn)曲線,買(mǎi)的混標(biāo)37種脂肪酸甲酯(含量已知),只有25mg,我想請(qǐng)問(wèn)下這個(gè)濃度梯度該怎么設(shè)計(jì)呢? 發(fā)自小木蟲(chóng)Android客戶端 |
木蟲(chóng) (小有名氣)
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要看你儀器的性能了,你先把他們的檢出限和定量限測(cè)出來(lái),最后以37種物質(zhì)中定量限最大的作為起點(diǎn)(或大于定量限),依次升高為梯度,比如,最大的定量限3微克/升,那你可以從3開(kāi)始,或從5開(kāi)始,可以做:5,10,20,50,100,200,500,1000等等,或者選取其中幾個(gè)點(diǎn)(一般大于5個(gè),最少五個(gè)),如果樣品含量大超出標(biāo)曲,進(jìn)樣前要稀釋 |

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