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zhouhai2015新蟲 (初入文壇)
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老師您好，我最近用氣質(zhì)聯(lián)用測魚組織里的脂肪酸，買了37種混標(biāo)... 已有3人參與
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老師您好，我最近用氣質(zhì)聯(lián)用測魚組織里的脂肪酸，買了37種混標(biāo)(每種含量已知)，我可不可以直接用混標(biāo)配成不同梯度濃度，對每種我要測的脂肪酸做個標(biāo)準(zhǔn)曲線，用這標(biāo)準(zhǔn)曲線來定量呢？如果我有內(nèi)標(biāo)的話，改怎么定量呢？ @lovibond 發(fā)自小木蟲Android客戶端 |
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niekun0557031
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2樓2016-03-08 05:45:41
shenyingbin
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【答案】應(yīng)助回帖
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第一、可以的用混標(biāo)來做標(biāo)準(zhǔn)曲線的，一般采用外標(biāo)法，峰要分開。有標(biāo)準(zhǔn)品就用外標(biāo)就好。 第二、內(nèi)標(biāo)法(Internal Standard Method)是色譜分析中一種比較準(zhǔn)確的定量方法，尤其在沒有標(biāo)準(zhǔn)物對照時，此方法更顯其優(yōu)越性。內(nèi)標(biāo)法是將一定重量的純物質(zhì)作為內(nèi)標(biāo)物（參見內(nèi)標(biāo)物條）加到一定量的被分析樣品混合物中，然后對含有內(nèi)標(biāo)物的樣品進(jìn)行色譜分析，分別測定內(nèi)標(biāo)物和待測組分的峰面積（或峰高）及相對校正因子，按公式即可求出被測組分在樣品中的百分含量。 第三、采用內(nèi)標(biāo)法定量時，內(nèi)標(biāo)物的選擇十分重要。內(nèi)標(biāo)物應(yīng)當(dāng)是一個能得到純樣的已知化合物，這樣它能以準(zhǔn)確、已知的量加到樣品中去，它應(yīng)當(dāng)和被分析的樣品組分有基本相同或盡可能一致的物理化學(xué)性質(zhì)(如化學(xué)結(jié)構(gòu)、極性、揮發(fā)度及在溶劑中的溶解度等)、色譜行為和響應(yīng)特征，最好是被分析物質(zhì)的一個同系物。  |
3樓2016-03-08 08:21:38
zhouhai2015
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謝謝老師的回答！ 如果我用混標(biāo)做標(biāo)準(zhǔn)曲線的話，這個濃度梯度有沒有個好的建議呢？ 我買的是25mg的混標(biāo)里面還有37種脂肪酸，不是單標(biāo)！ 如果我用內(nèi)標(biāo)法的話，我存在兩個問題：第一，準(zhǔn)確稱量問題，內(nèi)標(biāo)物質(zhì)我可以準(zhǔn)確稱量，但待測樣品在甲酯化前可以準(zhǔn)確稱出來，甲酯化之后用正己烷萃取出來，怎么去稱它的質(zhì)量？ 第二，這個相對校正因子需要自己測么？ 發(fā)自小木蟲Android客戶端 |
4樓2016-03-08 09:50:27
zhouhai2015
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5樓2016-03-08 09:53:10
zinfly
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6樓2016-03-08 14:21:05
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zhouhai2015(99503102代發(fā)): 金幣+2, 回帖很精彩，謝謝應(yīng)助！ 2016-06-30 11:14:17
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可以用混標(biāo)來做標(biāo)準(zhǔn)曲線的，就叫做外標(biāo)法，用60m的柱子，應(yīng)該就能分開。脂肪酸做的太多了，你搜一搜文獻(xiàn)應(yīng)該就有很多，什么微生物代謝中的，土壤等等，叔丁基甲基醚作溶劑，甲酯化就可以。 內(nèi)標(biāo)法的話就要選擇一種內(nèi)標(biāo)物，內(nèi)標(biāo)物最好和分析的樣品組分有基本相同或盡可能一致，做標(biāo)準(zhǔn)曲線時，就是外標(biāo)的峰面積比上內(nèi)標(biāo)的峰面積，然后跟濃度做標(biāo)曲。內(nèi)標(biāo)更標(biāo)準(zhǔn)，因為它可以盡可能避免樣品基質(zhì)的影響，不過一般外標(biāo)法就可以。 |
7樓2016-03-08 17:07:52
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8樓2016-03-09 14:48:02
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我現(xiàn)在要做內(nèi)標(biāo)標(biāo)準(zhǔn)曲線，買的混標(biāo)37種脂肪酸甲酯(含量已知)，只有25mg，我想請問下這個濃度梯度該怎么設(shè)計呢？ 發(fā)自小木蟲Android客戶端 |
9樓2016-03-09 20:17:05
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10樓2016-03-10 12:39:09
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