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小李紙11銀蟲 (正式寫手)
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[求助]
求助，現(xiàn)在需要自己構(gòu)建重組質(zhì)粒，怎樣選擇合適的限制性內(nèi)切酶呢。。。 已有3人參與
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| 我已經(jīng)把含有目的基因的質(zhì)粒從大腸桿菌里提出來了，現(xiàn)在需要把它從該質(zhì)粒上切下來，然后連接到畢赤酵母的空質(zhì)粒上，請問我該如何選擇合適的酶進(jìn)行切割呢？需要考慮的因素有哪些呢？還有。。。是用雙酶切還是單酶切比較合適呢？謝謝啦。。。 |
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原海亮
木蟲 (著名寫手)
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【答案】應(yīng)助回帖
★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
小李紙11: 金幣+8, ★★★★★最佳答案 2016-03-17 14:13:07
小李紙11: 金幣+8, ★★★★★最佳答案 2016-03-17 14:13:07
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沒有合適的酶切位點，就需要通過pcr方法將目的基因從載體上擴(kuò)增下來，這時候就只用考慮酵母載體的酶切位點就行，選擇好之后，就在設(shè)計引物時把選好的酶切位點加到引物的5’端，然后加保護(hù)堿基就OK 發(fā)自小木蟲Android客戶端 |
9樓2016-03-16 18:24:21
2樓2016-03-15 11:28:45
小李紙11
銀蟲 (正式寫手)
- 應(yīng)助: 0 (幼兒園)
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- 專業(yè): 基因表達(dá)調(diào)控與表觀遺傳學(xué)
3樓2016-03-15 11:55:55
4樓2016-03-15 13:24:33
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