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zhushengsheng木蟲(chóng) (著名寫(xiě)手)
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[交流]
請(qǐng)教一下用LC-MS進(jìn)行定量是內(nèi)標(biāo)如何選擇？
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大家好，請(qǐng)教一下大家在做LC-MS定量時(shí)，這個(gè)內(nèi)標(biāo)是如何選擇的？ 一般有哪些常用的內(nèi)標(biāo)物呢？ 謝謝！ |
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zhushengsheng
木蟲(chóng) (著名寫(xiě)手)
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再請(qǐng)教您一個(gè)問(wèn)題： 大家好，請(qǐng)教一下藥代動(dòng)力學(xué)中采血時(shí)間點(diǎn)的選擇； 如果檢測(cè)方法的LLOQ是 1ng/mL， 半衰期是3小時(shí)； Tmax = 1小時(shí)； 采血時(shí)間點(diǎn)是： 0, 5min, 15min, 30min, 1h, 2h, 3h, 4h,5h, 6h, 8h, 10h, 12h, 18h, 24h; 進(jìn)行血藥濃度檢測(cè)的時(shí)候，發(fā)現(xiàn) 12h 的濃度為 30 ng/mL; 18h 的濃度為 8ng/mL， 24h時(shí)濃度為 2ng/mL，這個(gè)24小時(shí)的濃度還在LLOQ之上； 計(jì)算時(shí)采血到12小時(shí)的時(shí)候計(jì)算T1/2和; 采血終點(diǎn)設(shè)計(jì)為18小時(shí)的時(shí)候計(jì)算T1/2; 和采血到24小時(shí)的時(shí)候計(jì)算T1/2這個(gè)數(shù)據(jù)相差是蠻大的； 這種情況我的采血時(shí)間終點(diǎn)應(yīng)該設(shè)在哪個(gè)點(diǎn)呢？ |
6樓2016-03-28 10:50:22
stingdhk
鐵桿木蟲(chóng) (著名寫(xiě)手)
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小木蟲(chóng): 金幣+0.5, 給個(gè)紅包，謝謝回帖
zhushengsheng: 金幣+10 2016-03-26 16:34:55
小木蟲(chóng): 金幣+0.5, 給個(gè)紅包，謝謝回帖
zhushengsheng: 金幣+10 2016-03-26 16:34:55
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最理想的是同位素內(nèi)標(biāo)，但這個(gè)價(jià)格一般比較昂貴，購(gòu)買(mǎi)比較麻煩 其次找和你的待測(cè)物結(jié)構(gòu)相近的 最次只能是湊一個(gè)保留時(shí)間合適，響應(yīng)穩(wěn)定的 也可以找一下相關(guān)文獻(xiàn)或者有用你的待測(cè)物作內(nèi)標(biāo)的文獻(xiàn)，看文獻(xiàn)中都用的什么內(nèi)標(biāo) 有幾個(gè)據(jù)說(shuō)是做LC/MS用的比較多的內(nèi)標(biāo)，地塞米松，拉貝洛爾，阿普唑侖，普萘洛爾，柳氨酚，雙氯芬酸。當(dāng)然我也沒(méi)有試過(guò)，僅供參考哈 |
2樓2016-03-23 16:38:15
王老吉
新蟲(chóng) (初入文壇)
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小木蟲(chóng): 金幣+0.5, 給個(gè)紅包，謝謝回帖
zhushengsheng: 金幣+10 2016-03-26 16:35:02
小木蟲(chóng): 金幣+0.5, 給個(gè)紅包，謝謝回帖
zhushengsheng: 金幣+10 2016-03-26 16:35:02
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最好能用同位素的內(nèi)標(biāo)，因?yàn)樵诜椒▽W(xué)驗(yàn)證時(shí)候基質(zhì)效應(yīng)，化合物的生物樣品就算有基質(zhì)效應(yīng)，計(jì)算時(shí)可以用相對(duì)基質(zhì)效應(yīng)，但同位素內(nèi)標(biāo)比較昂貴，很多試劑公司不一定有貨。 一般我們常用的內(nèi)標(biāo)應(yīng)該滿(mǎn)足穩(wěn)定且結(jié)構(gòu)與待測(cè)化合物結(jié)構(gòu)相似，色譜行為也能接近的。但是如果找不到合適的，你也可以選擇比較常用的如安定（正離子），地塞米松（負(fù)離子）。 |
3樓2016-03-26 09:23:56
zhushengsheng
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謝謝您，看來(lái)問(wèn)到專(zhuān)家了，再問(wèn)您兩個(gè)問(wèn)題： 1）請(qǐng)問(wèn)用QQQ- LC-MS-MS定量，是不是兩個(gè)化合物不用分開(kāi)也可以定量？沒(méi)有做過(guò)液質(zhì)聯(lián)用，看別人啊內(nèi)標(biāo)和待測(cè)物1，待測(cè)物2出峰時(shí)間都一樣，還是可以定量？說(shuō)這個(gè)用離子對(duì)進(jìn)行定量，看質(zhì)譜的峰面積？ 2）請(qǐng)問(wèn)一下用試劑盒測(cè)定生物樣品中的血藥濃度，做藥代動(dòng)力學(xué)，這個(gè)方法要進(jìn)行方法學(xué)驗(yàn)證么？ |
4樓2016-03-26 16:44:55
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