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andyshang木蟲(chóng) (小有名氣)
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[求助]
PCR擴(kuò)增時(shí)目的條帶很暗~ 已有3人參與
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這幾天一直在從酵母基因組上P基因,結(jié)果P出來(lái)的目的條帶很暗。 PCR用的酶是Primerstar，反應(yīng)體系是50ul,加的模板量是3ul，DNTP 4ul,buffer 10ul,引物各1ul，水30ul,酶0.5ul， 反應(yīng)程序： 98℃ 5min, 98℃ 15s, 50℃ 30s, 72℃ 1min30s 72℃ 10min Administrator 2016-03-23 11hr 59min.jpg |
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牛振鵬8888
木蟲(chóng) (正式寫手)
神
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7樓2018-03-27 20:37:16
yeruge
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2樓2016-03-23 17:29:42
3樓2016-03-23 17:38:24
原海亮
木蟲(chóng) (著名寫手)
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【答案】應(yīng)助回帖
感謝參與，應(yīng)助指數(shù) +1
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不清楚你的循環(huán)數(shù)有多少，退火溫度有點(diǎn)低，基因組做模板最好做個(gè)優(yōu)化，體系里面模板量可以減少，酶量可以提高些，50微升體系可以分裝兩管各25微升進(jìn)行擴(kuò)增，祝好！ 發(fā)自小木蟲(chóng)Android客戶端 |
4樓2016-03-23 17:51:13
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