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nuomici0402新蟲(chóng) (初入文壇)
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液體培養(yǎng)基常見(jiàn)問(wèn)題 已有2人參與
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1. 液體培養(yǎng)基的保存是冷藏好還是冷凍好？ 要冷藏 因?yàn)橐后w培養(yǎng)基經(jīng)冷凍后再經(jīng)溶化時(shí)其溶液的pH值會(huì)發(fā)生改變?nèi)芤和儔A，某些成分溶解也會(huì)受到影響對(duì)細(xì)胞生長(zhǎng)不利。故液體培養(yǎng)基一定要存放在冷藏箱中。通常液體培養(yǎng)基在冷藏條件下可存放6個(gè)月 ~ 一年。 2. 液體培養(yǎng)基中谷氨酰胺的作用及使用方法。 幾乎所有的細(xì)胞對(duì)谷氨酰胺有較高的要求，細(xì)胞需要谷氨酰胺合成蛋白質(zhì)，在缺少谷氨酰胺時(shí)細(xì)胞生長(zhǎng)不良而死亡。所以各種培養(yǎng)液中都含有較大量的谷氨酰胺。谷氨酰胺在溶液中很不穩(wěn)定，應(yīng)置-20 ℃冰凍保存用前加入培養(yǎng)基中。加有谷氨酰胺的液體培養(yǎng)基4 ℃冰箱儲(chǔ)存兩周以上時(shí)應(yīng)重新加入原來(lái)量的谷氨酰胺。我們公司（杭州睿凱干細(xì)胞生物科技有限公司http://www.stemcells-cn.com/）一般配制分裝高濃度100倍的谷氨酰胺溶液1ml/支。每支1ml的谷氨酰胺加到99ml完全培養(yǎng)基中其終濃度為2mM/ml培養(yǎng)基。包裝為粉紅色-24℃保存。 3.培養(yǎng)用液pH對(duì)細(xì)胞生長(zhǎng)的影響。 由于大多數(shù)細(xì)胞適宜pH為7.2~7.4偏離此范圍對(duì)細(xì)胞將產(chǎn)生有害的影響。各種細(xì)胞對(duì)pH的要求也不完全相同，原代培養(yǎng)細(xì)胞一般對(duì)pH變動(dòng)耐受差，無(wú)限細(xì)胞系耐受力強(qiáng)。但總體來(lái)說(shuō)細(xì)胞耐酸性比耐堿性強(qiáng)一些偏酸環(huán)境中更利于細(xì)胞生長(zhǎng)。因此我們公司在配制培養(yǎng)用液時(shí)把液體的pH稍微調(diào)得偏酸一些。液體在經(jīng)過(guò)0.10um或0.22um濾膜過(guò)濾時(shí)溶液的pH還會(huì)向上浮動(dòng)0.2左右。  |
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小木蟲(chóng): 金幣+0.5, 給個(gè)紅包，謝謝回帖
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2樓2017-05-25 16:40:51
3樓2017-07-26 20:55:26
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