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液體培養(yǎng)基常見問題 已有2人參與
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1. 液體培養(yǎng)基的保存是冷藏好還是冷凍好? 要冷藏 因為液體培養(yǎng)基經(jīng)冷凍后再經(jīng)溶化時其溶液的pH值會發(fā)生改變?nèi)芤和儔A,某些成分溶解也會受到影響對細胞生長不利。故液體培養(yǎng)基一定要存放在冷藏箱中。通常液體培養(yǎng)基在冷藏條件下可存放6個月 ~ 一年。 2. 液體培養(yǎng)基中谷氨酰胺的作用及使用方法。 幾乎所有的細胞對谷氨酰胺有較高的要求,細胞需要谷氨酰胺合成蛋白質(zhì),在缺少谷氨酰胺時細胞生長不良而死亡。所以各種培養(yǎng)液中都含有較大量的谷氨酰胺。谷氨酰胺在溶液中很不穩(wěn)定,應置-20 ℃冰凍保存用前加入培養(yǎng)基中。加有谷氨酰胺的液體培養(yǎng)基4 ℃冰箱儲存兩周以上時應重新加入原來量的谷氨酰胺。我們公司(杭州睿凱干細胞生物科技有限公司http://www.stemcells-cn.com/)一般配制分裝高濃度100倍的谷氨酰胺溶液1ml/支。每支1ml的谷氨酰胺加到99ml完全培養(yǎng)基中其終濃度為2mM/ml培養(yǎng)基。包裝為粉紅色-24℃保存。 3.培養(yǎng)用液pH對細胞生長的影響。 由于大多數(shù)細胞適宜pH為7.2~7.4偏離此范圍對細胞將產(chǎn)生有害的影響。各種細胞對pH的要求也不完全相同,原代培養(yǎng)細胞一般對pH變動耐受差,無限細胞系耐受力強。但總體來說細胞耐酸性比耐堿性強一些偏酸環(huán)境中更利于細胞生長。因此我們公司在配制培養(yǎng)用液時把液體的pH稍微調(diào)得偏酸一些。液體在經(jīng)過0.10um或0.22um濾膜過濾時溶液的pH還會向上浮動0.2左右。 |
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