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圓加leaf新蟲(chóng) (小有名氣)
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[交流]
逆轉(zhuǎn)錄試劑盒和TA克隆試劑盒的區(qū)別是什么?
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本人準(zhǔn)備在大腸桿菌中轉(zhuǎn)入一段基因,以表達(dá)某個(gè)蛋白使大腸桿菌能生產(chǎn)新的東西。在重組DNA時(shí)遇到困惑,想驚叫各位老師 已知這段基因的mRNA 序列,我看了文章后,是這么理解:擴(kuò)增——凝膠電泳——回收PCR產(chǎn)物——轉(zhuǎn)化到細(xì)菌——提質(zhì)!獪y(cè)序,不知這么理解是不是對(duì)。我看到常用到兩個(gè)試劑盒,一個(gè)是逆轉(zhuǎn)錄試劑盒,一個(gè)是TA克隆試劑盒,我想請(qǐng)問(wèn)這兩個(gè)試劑盒的差別是什么?用逆轉(zhuǎn)錄試劑盒加引物然后去轉(zhuǎn)錄機(jī)子擴(kuò)展轉(zhuǎn)錄,得到的不就是擴(kuò)增的嗎,為什么還要再用TA克隆克隆,TA克隆試劑盒里是不是就有載體,有感受態(tài)細(xì)胞? |
鐵蟲(chóng) (正式寫(xiě)手)
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逆轉(zhuǎn)錄只是把RNA反轉(zhuǎn)錄成cDNA,TA克隆是克隆的一個(gè)方法,把你擴(kuò)增出來(lái)的目的片段切膠,回收,連接到載體,轉(zhuǎn)化進(jìn)入感受態(tài)細(xì)胞 發(fā)自小木蟲(chóng)Android客戶(hù)端 |
新蟲(chóng) (初入文壇)
新蟲(chóng) (小有名氣)
新蟲(chóng) (小有名氣)
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逆轉(zhuǎn)錄試劑盒,就是將mRNA反轉(zhuǎn)錄為cDNA,用來(lái)作為基因克隆,做PCR的模板。 發(fā)自小木蟲(chóng)Android客戶(hù)端 |
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