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圓加leaf新蟲 (小有名氣)
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[交流]
逆轉錄試劑盒和TA克隆試劑盒的區(qū)別是什么？
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本人準備在大腸桿菌中轉入一段基因，以表達某個蛋白使大腸桿菌能生產新的東西。在重組DNA時遇到困惑，想驚叫各位老師 已知這段基因的mRNA 序列，我看了文章后，是這么理解：擴增——凝膠電泳——回收PCR產物——轉化到細菌——提質粒——測序，不知這么理解是不是對。我看到常用到兩個試劑盒，一個是逆轉錄試劑盒，一個是TA克隆試劑盒，我想請問這兩個試劑盒的差別是什么？用逆轉錄試劑盒加引物然后去轉錄機子擴展轉錄，得到的不就是擴增的嗎，為什么還要再用TA克隆克隆，TA克隆試劑盒里是不是就有載體，有感受態(tài)細胞？ |
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2樓2016-03-24 16:02:32
圓加leaf
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3樓2016-03-24 16:17:01
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逆轉錄只是把RNA反轉錄成cDNA，TA克隆是克隆的一個方法，把你擴增出來的目的片段切膠，回收，連接到載體，轉化進入感受態(tài)細胞 發(fā)自小木蟲Android客戶端 |
4樓2016-03-24 21:51:35
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逆轉錄試劑盒，就是將mRNA反轉錄為cDNA，用來作為基因克隆，做PCR的模板。 發(fā)自小木蟲Android客戶端 |
5樓2016-03-25 00:12:13
maixiaodaou
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TA克隆就是一個簡單的用來克隆的T載體，可以將你克隆出來的目的片段連接到這個載體上，熱激轉化到大腸感覺的感受態(tài)細胞中，這樣可以保菌，保留你的目的基因，也可以用菌液提質粒用于測序 發(fā)自小木蟲Android客戶端 |
6樓2016-03-25 00:14:48
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