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圓加leaf新蟲 (小有名氣)
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[交流]
逆轉錄試劑盒和TA克隆試劑盒的區(qū)別是什么?
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本人準備在大腸桿菌中轉入一段基因,以表達某個蛋白使大腸桿菌能生產(chǎn)新的東西。在重組DNA時遇到困惑,想驚叫各位老師 已知這段基因的mRNA 序列,我看了文章后,是這么理解:擴增——凝膠電泳——回收PCR產(chǎn)物——轉化到細菌——提質粒——測序,不知這么理解是不是對。我看到常用到兩個試劑盒,一個是逆轉錄試劑盒,一個是TA克隆試劑盒,我想請問這兩個試劑盒的差別是什么?用逆轉錄試劑盒加引物然后去轉錄機子擴展轉錄,得到的不就是擴增的嗎,為什么還要再用TA克隆克隆,TA克隆試劑盒里是不是就有載體,有感受態(tài)細胞? |
新蟲 (小有名氣)
鐵蟲 (正式寫手)
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逆轉錄只是把RNA反轉錄成cDNA,TA克隆是克隆的一個方法,把你擴增出來的目的片段切膠,回收,連接到載體,轉化進入感受態(tài)細胞 發(fā)自小木蟲Android客戶端 |
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