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圓加leaf新蟲 (小有名氣)
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[交流]
想讓大腸桿菌表達(dá)它原來沒有的蛋白，是不是必需先構(gòu)建克隆載體再構(gòu)建表達(dá)載體？
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本人想轉(zhuǎn)一個新的基因進(jìn)大腸桿菌，讓他表達(dá)原來沒有的一種蛋白，研究它的代謝量。 方式是靠構(gòu)建質(zhì)粒，可是又看到有基因克隆載體，和表達(dá)載體，有點(diǎn)懵了，我是不是需要先用一個克隆載體，轉(zhuǎn)化進(jìn)感受態(tài)細(xì)胞，讓他復(fù)制，然后再提這個基因，再用這基因構(gòu)建一個表達(dá)載體，再轉(zhuǎn)進(jìn)細(xì)胞，然后才可以穩(wěn)定表達(dá)，研究代謝？！ 請各位前輩指導(dǎo)�。� |
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scofield111
銀蟲 (正式寫手)
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圓加leaf: 金幣+2 2016-04-12 15:39:27
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圓加leaf: 金幣+2 2016-04-12 15:39:27
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也不能一下打死，搖瓶難，發(fā)酵罐可能有點(diǎn)活性 發(fā)自小木蟲Android客戶端 |
13樓2016-04-02 00:24:39
sihaiming
銅蟲 (初入文壇)
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2樓2016-03-30 10:21:03
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圓加leaf: 金幣+4, 非常感謝！ 2016-03-30 13:41:53
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圓加leaf: 金幣+4, 非常感謝！ 2016-03-30 13:41:53
| 姑娘不需要，直接構(gòu)建表達(dá)載體就行，參考大腸桿菌蛋白表達(dá)操作流程步驟原理：http://www.detaibio.com/topics/dachangganjunbiaodaliucheng-sop.html |
3樓2016-03-30 10:27:50
原海亮
木蟲 (著名寫手)
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圓加leaf: 金幣+4 2016-03-30 13:42:18
小木蟲: 金幣+0.5, 給個紅包，謝謝回帖
圓加leaf: 金幣+4 2016-03-30 13:42:18
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其實克隆載體的概念太大也模糊，本身表達(dá)載體就是一個普通的克隆載體呀，只不過它本身經(jīng)過改造了，相對其他克隆載體，在蛋白表達(dá)方面更有優(yōu)勢，但基本的克隆載體功能它也具有。 發(fā)自小木蟲Android客戶端 |
4樓2016-03-30 12:24:49
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