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圓加leaf新蟲(chóng) (小有名氣)
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[交流]
想讓大腸桿菌表達(dá)它原來(lái)沒(méi)有的蛋白,是不是必需先構(gòu)建克隆載體再構(gòu)建表達(dá)載體?
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本人想轉(zhuǎn)一個(gè)新的基因進(jìn)大腸桿菌,讓他表達(dá)原來(lái)沒(méi)有的一種蛋白,研究它的代謝量。 方式是靠構(gòu)建質(zhì)粒,可是又看到有基因克隆載體,和表達(dá)載體,有點(diǎn)懵了,我是不是需要先用一個(gè)克隆載體,轉(zhuǎn)化進(jìn)感受態(tài)細(xì)胞,讓他復(fù)制,然后再提這個(gè)基因,再用這基因構(gòu)建一個(gè)表達(dá)載體,再轉(zhuǎn)進(jìn)細(xì)胞,然后才可以穩(wěn)定表達(dá),研究代謝?! 請(qǐng)各位前輩指導(dǎo)!! |
至尊木蟲(chóng) (職業(yè)作家)
資深木蟲(chóng)
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將目的基因與表達(dá)載體連接,導(dǎo)入大腸桿菌,誘導(dǎo)表達(dá),但不一定每個(gè)基因都能成功表達(dá)! 發(fā)自小木蟲(chóng)Android客戶端 |
銅蟲(chóng) (初入文壇)
| 姑娘不需要,直接構(gòu)建表達(dá)載體就行,參考大腸桿菌蛋白表達(dá)操作流程步驟原理:http://www.detaibio.com/topics/dachangganjunbiaodaliucheng-sop.html |
木蟲(chóng) (著名寫(xiě)手)
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其實(shí)克隆載體的概念太大也模糊,本身表達(dá)載體就是一個(gè)普通的克隆載體呀,只不過(guò)它本身經(jīng)過(guò)改造了,相對(duì)其他克隆載體,在蛋白表達(dá)方面更有優(yōu)勢(shì),但基本的克隆載體功能它也具有。 發(fā)自小木蟲(chóng)Android客戶端 |

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