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圓加leaf新蟲 (小有名氣)
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[交流]
想讓大腸桿菌表達它原來沒有的蛋白,是不是必需先構建克隆載體再構建表達載體?
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本人想轉(zhuǎn)一個新的基因進大腸桿菌,讓他表達原來沒有的一種蛋白,研究它的代謝量。 方式是靠構建質(zhì)粒,可是又看到有基因克隆載體,和表達載體,有點懵了,我是不是需要先用一個克隆載體,轉(zhuǎn)化進感受態(tài)細胞,讓他復制,然后再提這個基因,再用這基因構建一個表達載體,再轉(zhuǎn)進細胞,然后才可以穩(wěn)定表達,研究代謝?! 請各位前輩指導。 |
新蟲 (小有名氣)
銅蟲 (初入文壇)
| 姑娘不需要,直接構建表達載體就行,參考大腸桿菌蛋白表達操作流程步驟原理:http://www.detaibio.com/topics/dachangganjunbiaodaliucheng-sop.html |
木蟲 (著名寫手)
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其實克隆載體的概念太大也模糊,本身表達載體就是一個普通的克隆載體呀,只不過它本身經(jīng)過改造了,相對其他克隆載體,在蛋白表達方面更有優(yōu)勢,但基本的克隆載體功能它也具有。 發(fā)自小木蟲Android客戶端 |

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