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圓加leaf新蟲 (小有名氣)
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[交流]
想讓大腸桿菌表達它原來沒有的蛋白，是不是必需先構(gòu)建克隆載體再構(gòu)建表達載體？
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本人想轉(zhuǎn)一個新的基因進大腸桿菌，讓他表達原來沒有的一種蛋白，研究它的代謝量。 方式是靠構(gòu)建質(zhì)粒，可是又看到有基因克隆載體，和表達載體，有點懵了，我是不是需要先用一個克隆載體，轉(zhuǎn)化進感受態(tài)細胞，讓他復(fù)制，然后再提這個基因，再用這基因構(gòu)建一個表達載體，再轉(zhuǎn)進細胞，然后才可以穩(wěn)定表達，研究代謝？！ 請各位前輩指導(dǎo)��！ |
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圓加leaf
新蟲 (小有名氣)
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5樓2016-03-30 13:41:13
sihaiming
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2樓2016-03-30 10:21:03
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圓加leaf: 金幣+4, 非常感謝！ 2016-03-30 13:41:53
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| 姑娘不需要，直接構(gòu)建表達載體就行，參考大腸桿菌蛋白表達操作流程步驟原理：http://www.detaibio.com/topics/dachangganjunbiaodaliucheng-sop.html |
3樓2016-03-30 10:27:50
原海亮
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圓加leaf: 金幣+4 2016-03-30 13:42:18
小木蟲: 金幣+0.5, 給個紅包，謝謝回帖
圓加leaf: 金幣+4 2016-03-30 13:42:18
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其實克隆載體的概念太大也模糊，本身表達載體就是一個普通的克隆載體呀，只不過它本身經(jīng)過改造了，相對其他克隆載體，在蛋白表達方面更有優(yōu)勢，但基本的克隆載體功能它也具有。 發(fā)自小木蟲Android客戶端 |
4樓2016-03-30 12:24:49
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