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小木蟲論壇-學術科研互動平臺 » 化學化工區(qū) » 分析 » 色譜質譜 » 求助氨基酸柱前衍生
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小豆芽_won銀蟲 (小有名氣)
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[求助]
求助氨基酸柱前衍生 已有1人參與
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我看了一篇關于D,L-氨基酸檢測的文章，用c-18柱子和柱前衍生的辦法能分析某些氨基酸，衍生劑是OPA和Boc-L-Cys，我的衍生劑配法是兩種衍生劑各0.1g用1mL無水乙醇溶解，加入100μL的巰基乙醇做還原劑，再用pH6.5的硼酸鹽緩沖液定容至10mL，在線的柱前衍生。流動相是磷酸鹽：乙腈：四氫呋喃（A:92:5:3,B：45:50:5,V:V）線性洗脫。柱溫40℃，熒光檢測，激發(fā)和放射波長為334和443。 我做的標樣是0.1g/L的D-Arg和L-Arg，但是同一個樣品跑出來的峰毫無重現(xiàn)性，也看不出什么規(guī)律，有時2分鐘就出峰，有時20多分鐘出峰，峰形也很怪。 請教我的衍生劑配法有沒有問題，問題可能出現(xiàn)在哪里呢，還有什么要注意的嗎？我第一次用液相，求教啊 |
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