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小豆芽_won銀蟲 (小有名氣)
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[求助]
求助氨基酸柱前衍生 已有1人參與
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我看了一篇關(guān)于D,L-氨基酸檢測(cè)的文章,用c-18柱子和柱前衍生的辦法能分析某些氨基酸,衍生劑是OPA和Boc-L-Cys,我的衍生劑配法是兩種衍生劑各0.1g用1mL無水乙醇溶解,加入100μL的巰基乙醇做還原劑,再用pH6.5的硼酸鹽緩沖液定容至10mL,在線的柱前衍生。流動(dòng)相是磷酸鹽:乙腈:四氫呋喃(A:92:5:3,B:45:50:5,V:V)線性洗脫。柱溫40℃,熒光檢測(cè),激發(fā)和放射波長(zhǎng)為334和443。 我做的標(biāo)樣是0.1g/L的D-Arg和L-Arg,但是同一個(gè)樣品跑出來的峰毫無重現(xiàn)性,也看不出什么規(guī)律,有時(shí)2分鐘就出峰,有時(shí)20多分鐘出峰,峰形也很怪。 請(qǐng)教我的衍生劑配法有沒有問題,問題可能出現(xiàn)在哪里呢,還有什么要注意的嗎?我第一次用液相,求教啊 |
銀蟲 (小有名氣)
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新蟲 (初入文壇)
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