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紅箋小字木蟲 (小有名氣)
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[求助]
用pDM4基因敲入，雙交換篩不到突變體
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| 宿主菌為假結(jié)核耶爾森氏菌，之前用pDM4做過兩次基因敲除或敲入，雙交換后篩20個左右，有4到5個為突變體。這一次同時做3個，就是在基因組上的目的基因C端融合表達熒光蛋白，單交換都很順利得到，但是15%蔗糖平板劃線后，篩的單菌落都是野生型，每個篩了50個左右。上下游同源臂500到600bp，得不到突變體的原因是什么？請有經(jīng)驗的蟲友指點一二，謝謝。 |
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4樓2016-04-05 21:58:09
2樓2016-04-05 20:47:53
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木蟲 (小有名氣)
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3樓2016-04-05 21:51:25
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5樓2016-04-13 19:02:45
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