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ujsyangyong鐵桿木蟲 (著名寫手)
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[求助]
GFP腺病毒感染細(xì)胞后子代細(xì)胞還帶綠色熒光嗎？ 已有1人參與
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| 請教各位蟲友一個(gè)問題，想用GFP腺病毒感染細(xì)胞用于標(biāo)記細(xì)胞，不知道子代細(xì)胞是否還具有綠色熒光。想將不同細(xì)胞共培養(yǎng)后用流式細(xì)胞儀分選，之前試過核熒光染料，效果不好，不知道蟲友還有其他好的標(biāo)記方法推薦不？謝謝！ |
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ujsyangyong
鐵桿木蟲 (著名寫手)
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3樓2016-04-09 20:07:52
ken19860823
木蟲 (正式寫手)
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你說的子代應(yīng)該是傳代后的細(xì)胞吧。病毒整合到基因組就會(huì)穩(wěn)定表達(dá)gfp，瞬時(shí)表達(dá)幾代傳代就丟失了。你應(yīng)該除了gfp外還需要一個(gè)篩選基因如puro，要藥殺幾代后都帶綠色熒光后基本就是整合到基因組了。你不篩選，傳幾代百分之99以上都是不帶gfp得了，你怎么用流式呢。 發(fā)自小木蟲Android客戶端 |
2樓2016-04-09 18:48:49
感謝參與，應(yīng)助指數(shù) +1
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4樓2016-04-11 23:16:47
ujsyangyong
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5樓2016-04-12 09:12:37
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