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zhongliruoqi新蟲 (小有名氣)
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[求助]
請教小鼠腦片的冰凍切片的相關(guān)問題 已有1人參與
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大家好，請問有沒有大俠做過腦片的冰凍切片的？最近需要做相關(guān)的免疫實驗，腦片380um，純純的新手。。。而且實驗室沒有做相關(guān)實驗的。。各種查閱資料經(jīng)驗以及請教其他實驗室做過組織冰凍切片的同學(xué)后，自己在嘗試4%多聚甲醛固定過24h、4h的腦片在OCT包埋（剪去尖部的1.5mL EP管作為容器）和液氮速凍時還是感覺問題重重，主要有以下幾點，希望可以與各位有相關(guān)經(jīng)驗的同志們交流學(xué)習(xí)，謝謝大家！ 1.如果后續(xù)做免疫熒光的話，腦片切多少um效果更好？8um可以嗎？ 2.OCT包埋時，腦片距離包埋完畢時的OCT表面多少距離比較好（因為涉及到冰凍切片時的修塊問題） 3.腦片在OCT中很難保持水平，總會出現(xiàn)傾斜，如何解決呢？ 4.OCT包埋時總會有些大小不等的氣泡，會影響之后的液氮速凍嗎？因為發(fā)現(xiàn)液氮速凍后，包埋劑的表面不平整，總有些突起狀 5.如果在液氮速凍時，釣入液氮罐的放有包埋好的樣品的EP管接觸到了漏入自制小盒的液氮液體，出現(xiàn)“沸騰狀”，會對包埋的樣品有影響嗎？ 希望路過的朋友們可以給出一些意見或建議，交流學(xué)習(xí)，謝謝大家！ |
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7樓2016-04-26 08:33:45
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8樓2016-04-26 09:26:19
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10樓2016-04-27 09:02:10
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