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北京石油化工學(xué)院2026年研究生招生接收調(diào)劑公告
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weiyuanzheng

銅蟲 (小有名氣)

[求助] 關(guān)于斑馬魚的成份測定 已有1人參與

小蟲目前在做斑馬魚的體成份分析,非常想向大家請教一下,斑馬魚的成魚體重差不多只有0.7g左右的樣子,肝臟也就只有0.003g,那么我怎么才能測定其肝臟中粗脂肪和HUFA組成成份?AOAC等方法,基本上都要求樣品量很大(5g),那我豈不是要?dú)⑸锨掺~?。!
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雨雪寒天

銀蟲 (小有名氣)

您是打算用什么方法測呢?GC or HPLC-MS? 用不著那么多吧,我們平時(shí)測脂,做肝臟就用10-50mg左右的樣本,魚的肝臟相對來說脂質(zhì)含量應(yīng)該不算太低。斑馬魚視網(wǎng)膜都做過,估計(jì)比肝更小

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夢不是用來做的,而是用來實(shí)現(xiàn)的!
7樓2016-05-13 22:19:21
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zinfly

專家顧問 (職業(yè)作家)

【答案】應(yīng)助回帖

★ ★ ★ ★ ★
感謝參與,應(yīng)助指數(shù) +1
weiyuanzheng: 金幣+5, 有幫助 2016-05-11 11:35:24
給你推薦個(gè)文獻(xiàn)http://www.sciencedirect.com/sci ... i/S0044848608001075
里面用的不多,5g一般是常見是食品,整體這么多,

題外話:既然這么小的東西,單測肝臟有意義么?
另外你這個(gè)數(shù)據(jù),肝臟僅僅占0.4%,感覺不對吧。
2樓2016-05-10 10:45:17
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weiyuanzheng

銅蟲 (小有名氣)

引用回帖:
2樓: Originally posted by zinfly at 2016-05-10 10:45:17
給你推薦個(gè)文獻(xiàn)http://www.sciencedirect.com/science/article/pii/S0044848608001075
里面用的不多,5g一般是常見是食品,整體這么多,

題外話:既然這么小的東西,單測肝臟有意義么?
另外你這個(gè)數(shù)據(jù),肝臟僅 ...

謝謝您的提醒,數(shù)據(jù)給成雄魚性腺了,肝臟差不多是體重0.8g的魚,肝臟0.026g的樣子,也就是超過3%的樣子。如您所問,我主要是想做飼料對魚生長和魚體組成的影響,可以測全魚(whole body)、肌肉(muscle)的粗蛋白、粗脂肪,HUFA也可以分析;但是肝臟作為魚類重要的脂類代謝器官,如果能測定其中的HUFA組成和含量,對研究飼料營養(yǎng)很有指導(dǎo)意義。所以急切盼望專家指導(dǎo)一下肝臟粗脂肪的測定和游離脂肪酸的抽提以便能用于GC分析,謝謝啦,急盼您的回復(fù)
沒有人生來灑脫,都總是在哭過以后才會(huì)感到輕松許多。
3樓2016-05-11 11:42:10
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weiyuanzheng

銅蟲 (小有名氣)

引用回帖:
2樓: Originally posted by zinfly at 2016-05-10 10:45:17
給你推薦個(gè)文獻(xiàn)http://www.sciencedirect.com/science/article/pii/S0044848608001075
里面用的不多,5g一般是常見是食品,整體這么多,

題外話:既然這么小的東西,單測肝臟有意義么?
另外你這個(gè)數(shù)據(jù),肝臟僅 ...

您好,首先謝謝您推薦的文章。這篇文獻(xiàn)之前一直有些疑問,還望您解答:Fatty acid determination was carried out on experimental diets and tissues. Livers, muscles and ovaries were sampled from 20 fish randomly picked from the replicate tanks per experimental diet at the end of the feeding trial. Total lipid was extracted from samples by homogenization in chloroform/methanol (2:1, v/v) (Bligh and Dyer, 1959), methylated and transesterified with boron trifluoride in methanol (AOAC, 1997).他們用了20尾雌魚,雌魚的肝臟加起來差不多也就是0.68g,但是這篇文獻(xiàn)參考的試驗(yàn)方法,鱈魚肌肉選了100g!估計(jì)最低限也就是10g,感覺相差很多呀,這樣的話,我不得殺上千條魚?。
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4樓2016-05-11 11:55:34
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weiyuanzheng

銅蟲 (小有名氣)

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4樓: Originally posted by weiyuanzheng at 2016-05-11 11:55:34
您好,首先謝謝您推薦的文章。這篇文獻(xiàn)之前一直有些疑問,還望您解答:Fatty acid determination was carried out on experimental diets and tissues. Livers, muscles and ovaries were sampled from 20 fish ra ...

也就是這個(gè)馬來西亞做斑馬魚的,提取斑馬魚肝臟的脂肪酸,方法參考了(Bligh and Dyer, 1959),但是這篇文獻(xiàn)里面用的鱈魚肉至少100g
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5樓2016-05-11 12:00:08
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zinfly

專家顧問 (職業(yè)作家)

引用回帖:
3樓: Originally posted by weiyuanzheng at 2016-05-11 11:42:10
謝謝您的提醒,數(shù)據(jù)給成雄魚性腺了,肝臟差不多是體重0.8g的魚,肝臟0.026g的樣子,也就是超過3%的樣子。如您所問,我主要是想做飼料對魚生長和魚體組成的影響,可以測全魚(whole body)、肌肉(muscle)的粗蛋白 ...

標(biāo)準(zhǔn)提供的是一個(gè)方法,更重要的步驟,所用的試劑等。
而不是每一步的限量。你完全可以說,參照**那篇文獻(xiàn)或者哪個(gè)標(biāo)準(zhǔn),但是做了修改,具體方法如下。
那些標(biāo)準(zhǔn)是更加準(zhǔn)確一些,但是量少一點(diǎn),也是可以接受的。
6樓2016-05-11 13:12:24
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weiyuanzheng

銅蟲 (小有名氣)

引用回帖:
7樓: Originally posted by 雨雪寒天 at 2016-05-13 22:19:21
您是打算用什么方法測呢?GC or HPLC-MS? 用不著那么多吧,我們平時(shí)測脂,做肝臟就用10-50mg左右的樣本,魚的肝臟相對來說脂質(zhì)含量應(yīng)該不算太低。斑馬魚視網(wǎng)膜都做過,估計(jì)比肝更小

嗯嗯,謝謝提醒,主要是我們這邊沒有HPLC-MS,送樣到檢測中心,那邊好狠要10g。!樣品預(yù)處理沒法做,上樣肯定沒問題,對啦粗脂肪有什么好的測定方法嗎?樣品量減少到0.5g?
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8樓2016-05-17 11:19:10
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weiyuanzheng

銅蟲 (小有名氣)

送紅花一朵
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7樓: Originally posted by 雨雪寒天 at 2016-05-13 22:19:21
您是打算用什么方法測呢?GC or HPLC-MS? 用不著那么多吧,我們平時(shí)測脂,做肝臟就用10-50mg左右的樣本,魚的肝臟相對來說脂質(zhì)含量應(yīng)該不算太低。斑馬魚視網(wǎng)膜都做過,估計(jì)比肝更小

還有粗蛋白你們是怎么測定的,BCA法可以嗎,這樣的話20mg就ok,但是我看了好多文獻(xiàn),基本上沒人用BCA的,到時(shí)考馬斯量藍(lán)法一大把,但是考馬斯亮藍(lán)法誤差很大哦,沒有BCA法穩(wěn)定的。
沒有人生來灑脫,都總是在哭過以后才會(huì)感到輕松許多。
9樓2016-05-17 11:22:01
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weiyuanzheng

銅蟲 (小有名氣)

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6樓: Originally posted by zinfly at 2016-05-11 13:12:24
標(biāo)準(zhǔn)提供的是一個(gè)方法,更重要的步驟,所用的試劑等。
而不是每一步的限量。你完全可以說,參照**那篇文獻(xiàn)或者哪個(gè)標(biāo)準(zhǔn),但是做了修改,具體方法如下。
那些標(biāo)準(zhǔn)是更加準(zhǔn)確一些,但是量少一點(diǎn),也是可以接受的。...

如果是要求2g,你用1.5g也ok,但是減少到50mg,這方法本身誤差就很大,系統(tǒng)誤差是沒避免的,方法本身就已經(jīng)有問題了。
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10樓2016-05-17 11:23:25
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