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弒者星魂

金蟲 (正式寫手)
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anti-flag m2 affinity gel洗脫問題
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我最近構建了一個帶有flag標簽的重組載體，并且注射了煙草。初步的western blot結果顯示有目的蛋白產(chǎn)生，而且beads也能純化目的蛋白，但我始終無法用3×flag peptide將目的蛋白洗脫下了，有哪位大神用過這個產(chǎn)品，有什么經(jīng)驗可以分享一下嗎，謝謝。（產(chǎn)品是sigma公司的，貨號F2426）

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弒者星魂

金蟲 (正式寫手)
產(chǎn)品全名：EZview Red ANTI-FLAG M2 Affinity Gel

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49樓2016-05-13 10:09:21
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dailywish

木蟲 (正式寫手)
★
小木蟲: 金幣+0.5, 給個紅包，謝謝回帖
濃度和洗脫時間對嗎 或者是目的蛋白表達量太少 flag pepitite體積過大 一般30—50微升

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84樓2016-05-13 13:20:57
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弒者星魂

金蟲 (正式寫手)
引用回帖:
84樓: Originally posted by dailywish at 2016-05-13 13:20:57
濃度和洗脫時間對嗎 或者是目的蛋白表達量太少 flag pepitite體積過大 一般30—50微升

說明書上說的是100ul，我看洗脫之后的beads上目的蛋白還很多，就加大了洗脫體積

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89樓2016-05-13 13:41:50
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dailywish

木蟲 (正式寫手)
★
小木蟲: 金幣+0.5, 給個紅包，謝謝回帖
引用回帖:
89樓: Originally posted by 弒者星魂 at 2016-05-13 13:41:50
說明書上說的是100ul，我看洗脫之后的beads上目的蛋白還很多，就加大了洗脫體積
...

你怎么知道目的蛋白很多 你肉眼看到的beads上的東西一般都是沒洗干凈的脂質

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100樓2016-05-13 15:19:27
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lxw2023樓
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安-若10樓
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