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Yuanfang_818金蟲 (小有名氣)
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[求助]
乳酸菌感受態(tài)細(xì)胞制備 已有2人參與
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請(qǐng)教一下，有知道乳酸菌感受態(tài)細(xì)胞怎么自己做的嗎？我做的是乳酸乳球菌，其他的也可以～ 發(fā)自小木蟲Android客戶端 |
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2樓2016-05-25 12:46:09
Yuanfang_818
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3樓2016-05-25 13:52:15
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| 乳酸菌感受態(tài)很好做，基本和大腸做法差不多，主要是洗液不同，網(wǎng)上應(yīng)該有很多，你需要注意的是乳酸菌要多洗兩遍，每次都要棄干凈，應(yīng)為培養(yǎng)液離子很多，洗不干凈容易爆杯，還有就是感受態(tài)用完不要用上次剩下的感受態(tài)劃線做感受態(tài)，要用最初純化好的細(xì)胞做感受態(tài)，如果不這樣，乳酸菌感受態(tài)細(xì)胞會(huì)退化，希望可以幫助到你 |
4樓2016-05-27 20:36:59
finland
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我的一點(diǎn)電轉(zhuǎn)化心得就是，細(xì)胞濃度要高（很關(guān)鍵），甘氨酸多洗兩便（洗掉離子），外源片段濃度也要高。然后點(diǎn)擊不擊穿就好�？倳�(huì)長出來幾個(gè)轉(zhuǎn)化子的。 另外乳酸菌很多是厭氧的，如果沒有二氧化碳培養(yǎng)條件的話，采用傾倒平板法比涂布法培養(yǎng)更容易獲得轉(zhuǎn)化子。 我做實(shí)驗(yàn)很粗放的，經(jīng)常擊穿了也能獲得轉(zhuǎn)化子，呵呵�？赡芘c質(zhì)粒片段大小有關(guān)吧。  我做的外源質(zhì)粒是3kb到6kb之間。 |
5樓2016-05-27 22:06:59
Yuanfang_818
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6樓2016-05-27 22:57:30
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7樓2016-05-27 22:59:50
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8樓2016-05-28 02:06:26
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9樓2016-07-26 15:35:01
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