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Yuanfang_818金蟲 (小有名氣)
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[求助]
乳酸菌感受態(tài)細(xì)胞制備 已有2人參與
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請(qǐng)教一下,有知道乳酸菌感受態(tài)細(xì)胞怎么自己做的嗎?我做的是乳酸乳球菌,其他的也可以~ 發(fā)自小木蟲Android客戶端 |
金蟲 (正式寫手)
| 乳酸菌感受態(tài)很好做,基本和大腸做法差不多,主要是洗液不同,網(wǎng)上應(yīng)該有很多,你需要注意的是乳酸菌要多洗兩遍,每次都要棄干凈,應(yīng)為培養(yǎng)液離子很多,洗不干凈容易爆杯,還有就是感受態(tài)用完不要用上次剩下的感受態(tài)劃線做感受態(tài),要用最初純化好的細(xì)胞做感受態(tài),如果不這樣,乳酸菌感受態(tài)細(xì)胞會(huì)退化,希望可以幫助到你 |
金蟲 (小有名氣)
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http://www.gaoyang168.com/bbs/viewthread.php?tid=2882400&_from=share&u=2336612&h=e0517803 發(fā)自小木蟲Android客戶端 |
金蟲 (小有名氣)
新蟲 (小有名氣)
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我的一點(diǎn)電轉(zhuǎn)化心得就是,細(xì)胞濃度要高(很關(guān)鍵),甘氨酸多洗兩便(洗掉離子),外源片段濃度也要高。然后點(diǎn)擊不擊穿就好?倳(huì)長(zhǎng)出來幾個(gè)轉(zhuǎn)化子的。 另外乳酸菌很多是厭氧的,如果沒有二氧化碳培養(yǎng)條件的話,采用傾倒平板法比涂布法培養(yǎng)更容易獲得轉(zhuǎn)化子。 我做實(shí)驗(yàn)很粗放的,經(jīng)常擊穿了也能獲得轉(zhuǎn)化子,呵呵?赡芘c質(zhì)粒片段大小有關(guān)吧。 我做的外源質(zhì)粒是3kb到6kb之間。 |
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