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小李紙11銀蟲 (正式寫手)
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[求助]
關(guān)于重組DNA轉(zhuǎn)化宿主細(xì)胞（大腸桿菌DH5α）后陽性克隆的篩選 已有4人參與
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| 求助，將目的片段和載體（酶切并純化后的）進(jìn)行連接反應(yīng)，然后轉(zhuǎn)化大腸桿菌感受態(tài)細(xì)胞，如果連接不成功，那單獨(dú)的目的片段或單獨(dú)的載體片段能導(dǎo)入到感受態(tài)細(xì)胞中嗎？如果能導(dǎo)入的話，導(dǎo)入后的宿主菌能正常生長嗎？ |
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super_mm
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4樓2016-06-02 15:12:15
yesucao
木蟲 (正式寫手)
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【答案】應(yīng)助回帖
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感謝參與，應(yīng)助指數(shù) +1
myprayer: 金幣+1, 贈人玫瑰·手有余香，謝謝你的理解與支持。myprayer祝您科研順利，文章多多。 2016-06-02 21:56:15
小李紙11: 金幣+6, ★★★很有幫助 2016-07-04 14:14:35
感謝參與，應(yīng)助指數(shù) +1
myprayer: 金幣+1, 贈人玫瑰·手有余香，謝謝你的理解與支持。myprayer祝您科研順利，文章多多。 2016-06-02 21:56:15
小李紙11: 金幣+6, ★★★很有幫助 2016-07-04 14:14:35
| 無論是化轉(zhuǎn)還是電轉(zhuǎn)，單獨(dú)的目的片段或單獨(dú)的載體片段都能導(dǎo)入到感受態(tài)細(xì)胞中，需要查看你用的是單酶切還是雙酶切了。若雙酶切，單獨(dú)的片段無法復(fù)制，所以在宿主菌中無法生長；若是單酶切，且未去磷酸化，載體會出現(xiàn)自連，在宿主菌中出現(xiàn)空載的情況。 |
2樓2016-06-01 22:39:57
易水秋寒
銀蟲 (初入文壇)
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3樓2016-06-02 08:54:56
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6樓2016-06-03 16:06:07
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