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小木蟲論壇-學術科研互動平臺 » 生物醫(yī)藥區(qū) » 分子生物 » 干擾/敲除 » 酵母基因刪除
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songyl1414新蟲 (初入文壇)
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酵母基因刪除
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最近在做酵母基因片段刪除，方法是兩步轉化，先用URA3，代替要被被刪除的部分；SC-URA3平板篩遠。再將要刪除片段的前后兩段基因經搭橋PCR連在一起，用它轉化去掉URA3,經5-FOA篩選后，PCR檢測，電泳正常情況是出現(xiàn)一條條帶，但出現(xiàn)了兩條，一條正確，一條表示URA3未被刪除。請問有人知道這是怎么回事嗎？急求。 發(fā)自小木蟲Android客戶端 |
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luckydog52
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2樓2016-07-09 10:33:08
songyl1414
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我是用了一對，來檢測URA3是否去除。理想情況是去除URA3，條帶大小700多一點。但出現(xiàn)兩條帶。沒有做過用四對引物來擴增檢測，它的原理是什么呀。。 發(fā)自小木蟲Android客戶端 |
3樓2016-07-09 12:50:55
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4樓2017-06-26 08:31:04
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5樓2017-12-27 13:29:59
seeeea
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6樓2018-01-10 16:11:01
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