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songyl1414新蟲 (初入文壇)
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[求助]
酵母基因刪除
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最近在做酵母基因片段刪除，方法是兩步轉(zhuǎn)化，先用URA3，代替要被被刪除的部分；SC-URA3平板篩遠(yuǎn)。再將要?jiǎng)h除片段的前后兩段基因經(jīng)搭橋PCR連在一起，用它轉(zhuǎn)化去掉URA3,經(jīng)5-FOA篩選后，PCR檢測，電泳正常情況是出現(xiàn)一條條帶，但出現(xiàn)了兩條，一條正確，一條表示URA3未被刪除。請(qǐng)問有人知道這是怎么回事嗎？急求。 發(fā)自小木蟲Android客戶端 |
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大搖大擺
銅蟲 (小有名氣)
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4樓2017-06-26 08:31:04
luckydog52
木蟲 (著名寫手)
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2樓2016-07-09 10:33:08
songyl1414
新蟲 (初入文壇)
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我是用了一對(duì)，來檢測URA3是否去除。理想情況是去除URA3，條帶大小700多一點(diǎn)。但出現(xiàn)兩條帶。沒有做過用四對(duì)引物來擴(kuò)增檢測，它的原理是什么呀。。 發(fā)自小木蟲Android客戶端 |
3樓2016-07-09 12:50:55
匿名
用戶注銷 (正式寫手)
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5樓2017-12-27 13:29:59
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