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bxzc12345新蟲 (小有名氣)
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[求助]
發(fā)酵液分離純化 已有4人參與
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紫外檢查不到，求有什么好的分離方法？最好具體 發(fā)自小木蟲IOS客戶端 |
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a2703521
金蟲 (小有名氣)
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3樓2016-07-19 10:15:56
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6樓2016-07-20 15:54:41
【答案】應(yīng)助回帖
感謝參與，應(yīng)助指數(shù) +1
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從發(fā)酵液中分離目標蛋白，通常使用的是親和層析的方法，使用的是小親和層析柱子。通常根據(jù)你目標蛋白的特性，選擇對應(yīng)的親和柱，比如，蛋白帶His-tag標簽，就選鎳柱；蛋白帶Fc片段，就選Protein A柱。依此類推，就是說，首先要搞清蛋白的結(jié)構(gòu)或者所帶標簽，再做分離。 另，你說的紫外檢查不到，是什么意思，通常培養(yǎng)基由于含有蛋白，會產(chǎn)生很多吸收峰的，發(fā)酵液不會檢測不到紫外吸收；如果你說的是純化后，紫外吸收檢測不到，就要看你的發(fā)酵液SDS-PAGE中有無表達出目標蛋白；如果有，但純化后就沒有了，則說明純化方法不對。改進的前提是給出更多的蛋白及你純化方法的信息，才能幫你支招。 祝您好運! |
7樓2016-07-20 17:27:40
bio_weiyaya
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8樓2016-07-21 09:11:54
bxzc12345
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9樓2016-07-21 22:04:48
10樓2016-07-22 21:41:29
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