 |
 |
 |
 |
 |
 |
||
 |
 |
 |
 |
 |
| 查看: 1361 | 回復(fù): 15 | ||
zhangxf2014新蟲 (小有名氣)
|
[求助]
定量PCR 已有3人參與
|
| 剛開始做定量PCR，用的SYBR染料法，陰性對(duì)照（只加水）總是有擴(kuò)增，Ct值都在35以下。之后換實(shí)驗(yàn)室、換水、換槍，引物重新合成，試劑也是新開的，但是還是存在陰性擴(kuò)增，電泳檢測(cè)，NTC條帶和目的基因的一致�，F(xiàn)在用UDG試劑做的，問(wèn)題仍然無(wú)法解決，實(shí)在想不通是什么原因？實(shí)驗(yàn)室有個(gè)老師半個(gè)月就把定量做完了，我這都做了2個(gè)月了。求大神賜教�。。�！ |
回復(fù)此樓» 猜你喜歡
不合理蛙科研實(shí)驗(yàn)之小鼠實(shí)驗(yàn)：嚴(yán)謹(jǐn)設(shè)計(jì)，解析生命機(jī)制的重要載體
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
不合理蛙科研實(shí)驗(yàn)之重金屬檢測(cè)：精準(zhǔn)篩查，守護(hù)健康與環(huán)境的防線
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
化學(xué)工程及工業(yè)化學(xué)論文潤(rùn)色/翻譯怎么收費(fèi)?
已經(jīng)有129人回復(fù)
-
不合理蛙科研實(shí)驗(yàn)之“蛙測(cè)重金屬我背鍋三千”
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
不合理蛙科研實(shí)驗(yàn)之“鼠逃三次我發(fā)三篇SCI”
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
納米粒度分析
已經(jīng)有3人回復(fù)
-
林科院林化所招收材料與化工專業(yè)碩士，坐標(biāo)南京
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
留學(xué)--博士招生
已經(jīng)有16人回復(fù)
-
化學(xué)工程，本211，求調(diào)劑，ab區(qū)不限
已經(jīng)有4人回復(fù)
-
邵陽(yáng)學(xué)院食品與化學(xué)工程學(xué)院碩士調(diào)劑
已經(jīng)有0人回復(fù)
» 本主題相關(guān)商家推薦: (我也要在這里推廣)
zhangxf2014
新蟲 (小有名氣)
- 應(yīng)助: 0 (幼兒園)
- 金幣: 906.5
- 散金: 50
- 紅花: 1
- 帖子: 56
- 在線: 34.5小時(shí)
- 蟲號(hào): 3993281
- 注冊(cè): 2015-07-27
- 性別: GG
- 專業(yè): 作物栽培與耕作學(xué)
2樓2016-08-07 18:14:26
3樓2016-08-07 18:58:29
zhangxf2014
新蟲 (小有名氣)
- 應(yīng)助: 0 (幼兒園)
- 金幣: 906.5
- 散金: 50
- 紅花: 1
- 帖子: 56
- 在線: 34.5小時(shí)
- 蟲號(hào): 3993281
- 注冊(cè): 2015-07-27
- 性別: GG
- 專業(yè): 作物栽培與耕作學(xué)
4樓2016-08-07 19:01:17
zhangxf2014
新蟲 (小有名氣)
- 應(yīng)助: 0 (幼兒園)
- 金幣: 906.5
- 散金: 50
- 紅花: 1
- 帖子: 56
- 在線: 34.5小時(shí)
- 蟲號(hào): 3993281
- 注冊(cè): 2015-07-27
- 性別: GG
- 專業(yè): 作物栽培與耕作學(xué)
5樓2016-08-07 19:57:49
vanchy
新蟲 (初入文壇)
- 應(yīng)助: 4 (幼兒園)
- 金幣: 330.6
- 帖子: 25
- 在線: 7.1小時(shí)
- 蟲號(hào): 3852712
- 注冊(cè): 2015-05-06
- 專業(yè): 生物大分子結(jié)構(gòu)與功能
6樓2016-08-08 09:07:44
skull123
木蟲 (正式寫手)
- 應(yīng)助: 33 (小學(xué)生)
- 金幣: 1537.4
- 散金: 250
- 紅花: 17
- 帖子: 503
- 在線: 150.1小時(shí)
- 蟲號(hào): 1207630
- 注冊(cè): 2011-02-21
- 專業(yè): 病原微生物與感染研究與診
【答案】應(yīng)助回帖
感謝參與，應(yīng)助指數(shù) +1
|
污染可能存在以下幾個(gè)方面： 1、以前有人做過(guò)你所擴(kuò)增的片段的擴(kuò)增，導(dǎo)致整個(gè)環(huán)境中到處都是。 2、擴(kuò)增的時(shí)候自己沒(méi)有注意好，導(dǎo)致環(huán)境、試劑、槍頭等污染了目的擴(kuò)增片段。 即使用了UDG，因?yàn)槿绻皇亲铋_始就用這個(gè)的話，是無(wú)法防止污染的。因?yàn)閁DG的原理導(dǎo)致它不能解決使用前所發(fā)生的污染，只能解決它自身體系的污染。 實(shí)驗(yàn)室污染解決的辦法：如果是整個(gè)大環(huán)境污染，每天晚上用5%的84消毒液霧化消毒，超凈臺(tái)、離心機(jī)轉(zhuǎn)子等關(guān)鍵儀器用10%84消毒液全部擦拭，第二天早晨再用清水擦洗環(huán)境，大約經(jīng)過(guò)一個(gè)星期后，應(yīng)該可以讓ct值降到37、38甚至沒(méi)有，提dna和提rna都別開超凈臺(tái)風(fēng)機(jī)（不開風(fēng)機(jī)提取核酸完全沒(méi)問(wèn)題的，而且如果污染，超凈臺(tái)上面的那層濾網(wǎng)上面估計(jì)富集了很多目的片段）、槍頭用帶濾芯的槍頭，EP管直接用商家處理好的。等等。 解決污染是一個(gè)非常痛苦的過(guò)程，因?yàn)檎麄�(gè)環(huán)境中都是84消毒液的味道是很難聞的一件事。我的實(shí)驗(yàn)室每天都在堅(jiān)持，但是還是經(jīng)常陰性對(duì)照的ct值在35之后起來(lái)。 其實(shí)最好的方法是找一個(gè)沒(méi)有做過(guò)你的基因相關(guān)的實(shí)驗(yàn)室，用全新的試劑來(lái)做這個(gè)實(shí)驗(yàn)，并且剛開始就使用UDG防污染體系。 |
7樓2016-08-08 10:24:43
zhangxf2014
新蟲 (小有名氣)
- 應(yīng)助: 0 (幼兒園)
- 金幣: 906.5
- 散金: 50
- 紅花: 1
- 帖子: 56
- 在線: 34.5小時(shí)
- 蟲號(hào): 3993281
- 注冊(cè): 2015-07-27
- 性別: GG
- 專業(yè): 作物栽培與耕作學(xué)
|
非常感謝！我覺(jué)得不是環(huán)境污染，因?yàn)橐苍谀莻�(gè)老師的實(shí)驗(yàn)室做過(guò)，他NTC沒(méi)有，我的都擴(kuò)出來(lái)了。 發(fā)自小木蟲Android客戶端 |
8樓2016-08-08 10:44:08
781055707
木蟲 (著名寫手)
- 應(yīng)助: 291 (大學(xué)生)
- 金幣: 3118.2
- 散金: 46
- 紅花: 19
- 帖子: 2030
- 在線: 579.3小時(shí)
- 蟲號(hào): 3046113
- 注冊(cè): 2014-03-13
- 性別: GG
- 專業(yè): 生物大分子結(jié)構(gòu)與功能
9樓2016-08-08 11:24:24
zhangxf2014
新蟲 (小有名氣)
- 應(yīng)助: 0 (幼兒園)
- 金幣: 906.5
- 散金: 50
- 紅花: 1
- 帖子: 56
- 在線: 34.5小時(shí)
- 蟲號(hào): 3993281
- 注冊(cè): 2015-07-27
- 性別: GG
- 專業(yè): 作物栽培與耕作學(xué)
10樓2016-08-08 12:19:36
相關(guān)版塊跳轉(zhuǎn)
我要訂閱樓主 zhangxf2014 的主題更新
| 最具人氣熱帖推薦 [查看全部] | 作者 | 回/看 | 最后發(fā)表 | |
|---|---|---|---|---|
|
[考研] 材料科學(xué)與工程求調(diào)劑 +6 | 深V宿舍吧 2026-03-29 | 6/300 |
|
|---|---|---|---|---|
|
|
[考研] 085600 材料與化工 329分求調(diào)劑 +14 | Mr. Z 2026-03-25 | 14/700 |
|
|
[考研] 327求調(diào)劑 +6 | 汲亦昊 2026-03-29 | 6/300 |
|
|
|
[考研] 11408軟件工程求調(diào)劑 +3 | Qiu學(xué)ing 2026-03-28 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 315求調(diào)劑 +4 | akie... 2026-03-28 | 5/250 |
|
|
|
[考研] 332求調(diào)劑 +4 | @MZB382400 2026-03-28 | 4/200 |
|
|
|
[考研] 283求調(diào)劑 +3 | A child 2026-03-28 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 339求調(diào)劑，想調(diào)回江蘇 +6 | 烤麥芽 2026-03-27 | 8/400 |
|
|
|
[考研] 292求調(diào)劑 +14 | 鵝鵝鵝額額額額?/a> 2026-03-25 | 15/750 |
|
|
|
[考研] 材料求調(diào)劑 一志愿哈工大總分298分，前三科223分 +5 | dongfang59 2026-03-27 | 5/250 |
|
|
|
[考研] 085701環(huán)境工程求調(diào)劑 +9 | 多久上課 2026-03-27 | 9/450 |
|
|
|
[考研] 330一志愿中國(guó)海洋大學(xué) 化學(xué)工程 085602 有讀博意愿 求調(diào)劑 +3 | wywy.. 2026-03-27 | 4/200 |
|
|
|
[考研] 求調(diào)劑 +4 | 零八# 2026-03-27 | 4/200 |
|
|
|
[考研] 調(diào)劑 +3 | 李嘉圖·S·路 2026-03-27 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 292求調(diào)劑 +4 | 求求了收下我吧?/a> 2026-03-26 | 4/200 |
|
|
|
[考研] 325求調(diào)劑 +5 | 李嘉圖·S·路 2026-03-23 | 5/250 |
|
|
|
[考研] 332求調(diào)劑 +6 | 032500 2026-03-25 | 6/300 |
|
|
|
[考研] 302求調(diào)劑 +4 | 錦衣衛(wèi)藤椒 2026-03-25 | 4/200 |
|
|
|
[考研] 一志愿武理085500機(jī)械專業(yè)總分300求調(diào)劑 +3 | an10101 2026-03-24 | 7/350 |
|
|
|
[考研] 一志愿重慶大學(xué)085700資源與環(huán)境，總分308求調(diào)劑 +7 | 墨墨漠 2026-03-23 | 8/400 |
|