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楊永芝銀蟲 (初入文壇)
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[求助]
畢赤酵母破壁 已有2人參與
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我用畢赤酵母CS115做表達(dá)(外源基因表達(dá)),但是每次破壁都破不了。用的是玻璃株破碎法。具體步驟:先收集細(xì)胞,用去離子水洗2兩次,加入100ul的PBSbuffer,再加入等體積的玻璃株漩渦(渦旋30s,冰上放置30s,反復(fù)8次)離心收集上清,電泳。 除此之外,還用了試劑盒提取,和0.3M的氫氧化鈉裂解,都沒有破壁。 在配置BMMY和BMGY培養(yǎng)基時,里面需要磷酸鉀。我先配的時候溶液是清澈的,但是滅菌后就是渾濁的。會不會有這個關(guān)系。然后,先在BMGY培養(yǎng)時,菌會有氨氣的味道,很刺鼻。有沒有誰可以解答我疑問。壳蟠笊裰更c!。。。 ![]() |
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