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楊永芝銀蟲 (初入文壇)
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[求助]
畢赤酵母破壁 已有2人參與
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我用畢赤酵母CS115做表達(dá)（外源基因表達(dá)），但是每次破壁都破不了。用的是玻璃株破碎法。具體步驟：先收集細(xì)胞，用去離子水洗2兩次，加入100ul的PBSbuffer，再加入等體積的玻璃株漩渦（渦旋30s，冰上放置30s，反復(fù)8次）離心收集上清，電泳。 除此之外，還用了試劑盒提取，和0.3M的氫氧化鈉裂解，都沒有破壁。 在配置BMMY和BMGY培養(yǎng)基時，里面需要磷酸鉀。我先配的時候溶液是清澈的，但是滅菌后就是渾濁的。會不會有這個關(guān)系。然后，先在BMGY培養(yǎng)時，菌會有氨氣的味道，很刺鼻。有沒有誰可以解答我疑問啊？求大神指點(diǎn)�。。。�！  |
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4樓2017-06-14 17:01:55
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5樓2018-04-23 11:48:29
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