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霍燁zz銀蟲 (小有名氣)
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[求助]
細(xì)胞系研究目的基因功能
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我想用細(xì)胞系研究特定基因的功能,之前看文獻(xiàn)接受到的思路是,超表達(dá)或是iRNA干擾 可是,超表達(dá)好像需要用體積比較大的卵母細(xì)胞才會(huì)比較好操作?(不是很清楚,看文獻(xiàn)中用的比較多的是非洲爪蟾卵母細(xì)胞......) iRNA干擾之前同門做過,好像有些轉(zhuǎn)染效率會(huì)不太好,最終的干擾效果也會(huì)受到影響 PS:還想請(qǐng)教一下,關(guān)于干擾效果,看目的基因的mRNA表達(dá)水平就可以了,還是需要看目的基因蛋白的表達(dá)水平?按我自己的理解,蛋白才是最終發(fā)揮功能的載體,應(yīng)該是蛋白的水平下降了,才能更好地確定目的基因的功能。 突然又聯(lián)想到最近幾年很火的CRISPR/Cas9,不知道能不能利用這個(gè)技術(shù)建立目的基因缺失的穩(wěn)定細(xì)胞系,從而更好地研究該基因的功能?難度大不大? 純小白,如有理解錯(cuò)誤的地方,還請(qǐng)各位蟲子多多指教。 謝謝大家! |
銀蟲 (小有名氣)
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